Цитологическое исследование костного мозга что это такое
Цитогенетический анализ клеток костного мозга (кариотип) – исследование, целью которого является оценка количества и структуры хромосом клеток кроветворной ткани.
Стандартное кариотипирование клеток костного мозга, стандартная цитогенетика в метафазных пластинках.
Chromosome Analysis, Bone Marrow, Karyotype, Cytogenetics, Cytogenetic Analysis, Chromosome Studies, Chromosome Karyotype.
Дифференциальное окрашивание хромосом.
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Общая информация об исследовании
Взятие костного мозга для исследования проводится посредством пункции кости. Манипуляцию выполняет врач. Чаще всего костный мозг аспирируется из грудины или задних остей подвздошных костей. После выбора места пункции и обработки кожи над ним раствором антисептика врач проводит послойную местную анестезию до надкостницы. После введения анестетика ждут наступления анестезии не менее одной минуты. Пункцию выполняют специальной иглой, которая имеет внутри стержень. Её продвигают сквозь мягкие ткани до надкостницы, затем с усилием внедряют вглубь костного вещества. После этого убирают стержень и шприцем набирают костный мозг. Во время аспирации возможно возникновение болевых ощущений из-за перепада давления в полости кости. Полученный костный мозг переливают в вакутейнер, содержащий гепарин натрия, и отправляют в лабораторию.
Большинство опухолей кроветворной системы связаны с возникновением генетических изменений в столовой клетке крови, которые приводят к её злокачественной трансформации и появлению опухолевого клона. Генетические нарушения специфичны для определенного заболевания, поэтому их обнаружение считается достоверным диагностическим критерием. Кроме того, наличие некоторых генетических аномалий может влиять на прогноз заболевания, его чувствительность к тем или иным способам лечения и, соответственно, помогает выбрать наилучшую тактику терапии. Стандартное цитогенетическое исследование клеток костного мозга представляет собой изучение количества и структуры хромосом клеток и позволяет выявить геномные (нарушения в количестве хромосом) и хромосомные (изменения в их структуре) мутации.
Хромосомы – структуры в ядре клетки, в которых компактно собрана генетическая информация в виде ДНК. Когда клетка находится в состоянии покоя, хромомосы упакованы в клеточном ядре и визуально различить их друг от друга невозможно. Однако в одну из фаз деления клетки, которая называется метафаза, хромосомы выстраиваются в одну плоскость в центре клетки, формируя так называемую метафазную пластинку. Именно такие метафазные пластинки и изучаются в процессе цитогенетического исследования. Кроветворные клетки костного мозга постоянно делятся, поэтому часть из них во время взятия как раз будет находиться в метафазе своего деления. Преимущество такого метода цитогенетического исследования в том, что оно не требует дополнительных воздействий на клетки для стимуляции деления и получения метафаз. После обработки биоматериала различными химическими веществами клетки фиксируют на предметных стеклах и производят окраску. Существует несколько методов окраски хромосом, каждый из которых позволяет лучше дифференцировать те или иные особенности их строения. Хромосомы анализируется как с помощью микроскопа, так и с использованием компьютерных аналитических систем, которые существенно повышают качество и скорость исследования.
Кариотипирование проводится как минимум на двадцати хорошо окрашенных, полных метафазных пластинках с хорошим разбросом хромосом. Исследователь подсчитывает их количество и проводит оценку структуры каждой путем сопоставления двух аналогичных хромосом и сравнения их с цитогенетическими картами.
Для чего используется исследование?
Когда назначается исследование?
Что означают результаты?
Нормальный кариотип человека выглядит следующим образом:
46,ХХ – нормальный кариотип женщины,
46,XY – нормальный кариотип мужчины,
Количество проанализированных метафаз, а также метафаз, в которых выявлены мутации, записывается в квадратных скобках. Для записи генетических аномалий существуют специальные правила, соответственно которым будет написан результат исследования при выявлении какой-либо мутации.
Количественные аномалии хромосом записываются как их общее число, перечисление половых хромосом и номер отсутствующей или лишней хромосомы с соответствующим знаком минус или плюс.
Для обозначения структурных аномалий используются специальные буквенные символы:
t – транслокация – участок одной хромосомы переносится на другую,
del – делеция – потеря участка хромосомы,
inv – инверсия – поворот участка хромосомы на 180 градусов,
— после которых указывается номер хромосомы, на которой они обнаружены, а также ее участок.
В заключении цитогенетического исследования содержится информация о виде мутации и доле метафазных пластинок, в которой она выявлена.
Что может влиять на результат?
Кто назначает исследование?
Цитологическое исследование отпечатков трепанобиоптата костного мозга. Подсчет миелограммы. в Ахты
Цитологическое исследование отпечатков трепанобиоптата костного мозга важно для понимания степени распространенности как онкогематологического заболевания, так и солидных опухолей, а также для первичной диагностики некоторых видов злокачественных новообразований.
Трепанобиоптат костного мозга получают путем забора биологического материала непосредственно из губчатых костей скелета.
Приём и исследование биоматериала
Когда нужно сдавать анализ Цитологическое исследование отпечатков трепанобиоптата костного мозга. Подсчет миелограммы.?
Подробное описание исследования
Красный костный мозг (миелоидная ткань) – основной орган кроветворения, расположен в губчатом веществе плоских костей (кости черепа, грудина, лопатки, позвонки, кости таза) и в эпифизах трубчатых костей. В нем находится множество стволовых кроветворных клеток, клетки-предшественники миело- и лимфопоэза, а также клетки крови на различных стадиях дифференцировки.
Основой диагностики заболеваний системы крови является морфологическое исследование пунктатов костного мозга, лимфатических узлов и мазков периферической крови. Данные цитологического исследования костного мозга чрезвычайно важны для выявления нарушений кроветворения.
Существуют два метода получения образцов костного мозга: аспирационная биопсия
и трепанобиопсия. При пункционном (аспирационном) анализе исследованию подвергается нативная клеточная взвесь (собственно костный мозг), при трепанобиопсии исследуется остеомедуллярный цилиндр (клеточная взвесь + микроокружение + кость). Метод трепанобиопсии костного мозга позволяет получить более полную информацию о состоянии костномозгового кроветворения.
Цитологическое исследование отпечатков трепанобиоптата костного мозга проводят с целью идентификации диагноза, для качественной и количественной оценки функции костномозгового кроветворения у пациентов с опухолевыми заболеваниями системы крови, анемиями и другими заболеваниями, а также с целью оценки проводимой терапии.
Трепанобиопсия костного мозга выполняется амбулаторно, под местной анестезией. Взятие биоматериала производится иглой Jamshidi в области задневерхней ости правой или левой подвздошной кости. После получения образца ткани на кожу накладывают асептическую повязку, пациент находится под наблюдением врачей 2-3 часа, после чего отправляется домой.
Отпечатки трепанобиоптата получают методом «прокатывания» столбика между двумя предметными стеклами. Препарат высушивается, маркируется и отправляется в лабораторию. В лаборатории отпечатки окрашиваются специальным красителем и анализируются под световым микроскопом.
В норме, состав костного мозга может подвергаться значительным изменениям в зависимости от возраста пациента, функционального состояния костного мозга, а также качества проводимой манипуляции.
Миелограмма – качественное и количественное исследование клеточного состава костного мозга. При подсчете миелограммы определяются клеточность состава, внешний вид клеток (моно/полиморфизм), количество мегакариоцитов, наличие скоплений опухолевых клеток.
При интерпретации миелограммы определяют процентное соотношение всех клеточных элементов отпечатка и морфологическое описание клеток в составе каждого из клеточных рядов.
Миелограмма представляет собой таблицу, в которой все клеточные элементы распределены в соответствии со своими клеточными линиями в зависимости от стадии их созревания
Цитологический анализ отпечатков трепанобиоптата и интерпретация миелограммы являются наиболее значимыми методами определения заболеваний системы кроветворения.
Цитологическое исследование костного мозга что это такое
На основании общеклинического анализа крови сложно дать оценку состояния гемопоэза. Более полное представление дает изучение костного мозга (цитологическое, цитохимическое и др.).
Цитологический анализ костного мозга играет большую роль в диагностике заболеваний кроветворной системы. Подсчет миелограммы дает представление о характере эритропоэза (нормобластический или мегалобластический), позволяет обнаружить клетки, характерные для различных заболеваний системы крови (множественной миеломы, острых лейкозов, хронического миелолейкоза, хронического лимфолейкоза, лейкемизированных неходжкинских лимфом, болезни Гоше, Ниманна-Пика, метастазов рака в костном мозге и др.).
Данные миелограммы необходимы для проведения дифференциального диагноза с лейкемоидными реакциями. Сопоставление данных костномозгового кроветворения с картиной периферической крови и клинической симптоматикой позволяет уточнить причину анемии.
Имеются абсолютные и относительные показания к стернальной пункции.
Абсолютные показания: все анемии (кроме типичной железодефицитной), различные цитопении (одноростковая, двуростковая, панцитопения), острые лейкозы, хронические лейкозы в начальной стадии (для подтверждения диагноза и исключения лейкемоидных реакций), выраженное изолированное увеличение СОЭ (для исключения множественной миеломы и макроглобулинемии Вальденстрема), подозрение на метастазы злокачественной опухоли в костном мозге.
Относительные показания: железодефицитные анемии, хронические лейкозы в развернутой стадии.
Аспирационная биопсия костного мозга является технически простым, безопасным и легкодоступным методом. Наиболее часто используется стернальная пункция, предложенная в 1927 г. М. И. Аринкиным и впервые выполненная на кафедре факультетской терапии Военно-медицинской академии. При необходимости можно пунктировать гребень или бугристость подвздошной кости, у детей — пяточную кость. Пункция грудины выполняется иглой И. А. Кассирского с предохранительным щитком. После взятия аспирата костного мозга производят подсчет количества миелокариоцитов, мегакариоцитов, ретикулоцитов, готовят мазки для подсчета миелограммы.
Нормальная миелограмма
| Показатели миелограммы | Среднее значение (%) | Пределы колебаний (%) |
| Ретикулярные клетки | 0,9 | 0,1-1,6 |
| Недифференцированные бласты | 0,6 | 0,1-1,1 |
| Миелобласты | 1,0 | 0,2-1,7 |
| Промиелоциты | 2,5 | 1,0-4,1 |
| Миелоциты нейтрофильные | 9,6 | 7,0-12,2 |
| Метамиелоциты нейтрофильные | 11,5 | 8,0-15,0 |
| Палочкоядерные нейтрофилы | 18,2 | 12,8-23,7 |
| Сегментоядерные нейтрофилы | 18,6 | 13,1-24,1 |
| Всего клеток нейтрофильного ряда | 60,8 | 52,7-68,9 |
| Миелоциты эозинофильные | 0,1 | 0,0-0,2 |
| Метамиелоциты эозинофильные | 0,2 | 0,1-0,4 |
| Эозинофилы | 2,8 | 0,4-5,2 |
| Всего клеток эозинофилъного ряда | 3,2 | 0,5-5,8 |
| Миелоциты базофильные | 0,1 | 0-0,3 |
| Базофилы | 0,1 | 0-0,3 |
| Всего клеток базофильного ряда | 0,2 | 0-0,5 |
| Лимфобласты | 0,1 | 0-0,2 |
| Пролимфоциты | 0,1 | 0-0,2 |
| Лимфоциты | 8,8 | 4,3-13,3 |
| Всего клеток лимфоидного ряда | 9,0 | 4,3-13,7 |
| Монобласты | 0,1 | 0-0,2 |
| Моноциты | 1,9 | 0,7-3,1 |
| Плазмобласты | 0,1 | 0-0,2 |
| Проплазмоциты | 0,1 | 0,1-0,2 |
| Плазматические клетки | 0,9 | 0,1-1,8 |
| Эритробласты | 0,6 | 0,2-1,1 |
| Нормобласты базофильные | 3,6 | 1,4-5,8 |
| Нормобласты полихроматофильные | 12,9 | 8,9-16,9 |
| Нормобласты оксифильные | 3,2 | 0,8-5,6 |
| Всего клеток эритроидного ряда | 20,5 | 14,5-26,5 |
| Мегакариоциты | 0,4 | 0,2-0,6 |
Миелокариоциты миелограммы. У здоровых людей количество миелокариоцитов (всех ядросодержащих клеток костного мозга) в камере Горяева составляет 50-250•10 9 /л.
Мегакариоциты миелограммы. Нормальное количество мегакариоцитов в камере Фукса-Розенталя составляет 0,05-0,1•10 6 /л. Необходимо также определять количество мегакариоцитов в окрашенных мазках в 250 полях зрения под малым увеличением и при подсчете миелограммы в процентах.
Следует помнить, что снижение уровня миелокариоцитов и мегакариоцитов в миелограмме отмечается также при разведении аспирата периферической кровью (технические погрешности при выполнении стернальной пункции).
Ретикулоциты миелограммы. Нормальное количество ретикулоцитов в костном мозге составляет 20-30%о. Увеличение их числа наблюдается при гемолитических и постгеморрагических анемиях.
Морфологический анализ клеток костного мозга (подсчет миелограммы) производят на 500 клеток костного мозга, после чего вычисляют процентное содержание каждого вида клеток.
При анализе миелограммы необходимо оценить клеточность костного мозга (нормо-, гипо- или гиперклеточный), дать качественную характеристику всех клеточных рядов с определением индексов созревания, лейкоэритробластического соотношения, характера эритропоэза (нормобластический, мегалобластический или с мегалобластоидными чертами) и количества митозов. Отдельно следует оценить мегакариоцитопоэз (количество и функция мегакариоцитов).
Костномозговой индекс созревания нейтрофилов определяется по формуле: (промиелоциты + миелоциты + метамиелоциты)/ (палочкоядерные + сегментоядерные нейтрофилы)
В норме костномозговой индекс созревания нейтрофилов равен 0,6-0,8.
Индекс созревания эритроидных клеток определяется по формуле: (полихроматофильные + оксифильные нормоциты)/(эритробласты + базофильные + полихроматофильные + оксифильные нормоциты)
В норме индекс созревания эритроидных клеток равен 0,8-0,9.
Уменьшение индекса свидетельствует о задержке гемоглобинизации и/или преобладании молодых базофильных нормоцитов, дает возможность ориентировочно оценить запасы и обмен железа в организме.
Лейкоэритробластическое соотношение определяется по формуле: (гранулоциты): (ядросодержащие клетки эритроидного ряда) и в норме составляет 3-4:1.
Количество митозов в норме составляет 3,5 на 1000 для клеток гранулоцитарного ряда и 5 на 1000 — для клеток эритроидного ряда.
Заключение по миелограмме не должно быть категоричным, поскольку для постановки диагноза необходимо учитывать клинические данные и показатели периферической крови.
Для более полной характеристики гемопоэза, особенно мегакариоцитопоэза, в ряде случаев требуется гистологическое исследование костного мозга методом трепанобиопсии.
Определение сидеробластов и сидероцитов в миелограмме
При железодефицитных и сидеробластных анемиях важно определять количество сидероцитов и сидеробластов — эритроцитов и эритробластов, содержащих в цитоплазме железо в виде гемосидерина и ферритина (зернышки синего цвета при окраске по Перлсу диаметром 0,2-1,5 мкм). У здоровых людей в периферической крови содержится 1,1-3,0% (в среднем 1,6%) сидероцитов. Содержание сидеробластов в костном мозге составляет 15-40% от всех клеток эритроидного ряда; количество гранул в них обычно 1-2 (не более 4).
Клиническое значение. При хронических железодефицитных анемиях отмечается снижение количества сидероцитов и сидеробластов в костном мозге, гранулы железа в них практически выявить не удается.
Увеличение количества сидеробластов с большим количеством гранул железа в каждом из них, появление кольцевых форм сидеробластов наблюдается при наследственных и приобретенных сидеробластных анемиях (интоксикация свинцом, один из вариантов миелодиспластического синдрома — рефрактерная анемия с кольцевыми сидеробластами).
Наряду с исследованием крови и костного мозга для диагностики специфических поражений и осложнений проводимой терапии в ряде случаев необходим анализ биологических жидкостей (мочи, кала, мокроты, экссудатов, ликвора).
Редактор: Искандер Милевски. Дата обновления публикации: 18.3.2021
Цитологическое исследование отпечатков трепанобиоптата костного мозга. Подсчет миелограммы. в Москве
Цитологическое исследование отпечатков трепанобиоптата костного мозга важно для понимания степени распространенности как онкогематологического заболевания, так и солидных опухолей, а также для первичной диагностики некоторых видов злокачественных новообразований.
Трепанобиоптат костного мозга получают путем забора биологического материала непосредственно из губчатых костей скелета.
Приём и исследование биоматериала
Когда нужно сдавать анализ Цитологическое исследование отпечатков трепанобиоптата костного мозга. Подсчет миелограммы.?
Подробное описание исследования
Красный костный мозг (миелоидная ткань) – основной орган кроветворения, расположен в губчатом веществе плоских костей (кости черепа, грудина, лопатки, позвонки, кости таза) и в эпифизах трубчатых костей. В нем находится множество стволовых кроветворных клеток, клетки-предшественники миело- и лимфопоэза, а также клетки крови на различных стадиях дифференцировки.
Основой диагностики заболеваний системы крови является морфологическое исследование пунктатов костного мозга, лимфатических узлов и мазков периферической крови. Данные цитологического исследования костного мозга чрезвычайно важны для выявления нарушений кроветворения.
Существуют два метода получения образцов костного мозга: аспирационная биопсия
и трепанобиопсия. При пункционном (аспирационном) анализе исследованию подвергается нативная клеточная взвесь (собственно костный мозг), при трепанобиопсии исследуется остеомедуллярный цилиндр (клеточная взвесь + микроокружение + кость). Метод трепанобиопсии костного мозга позволяет получить более полную информацию о состоянии костномозгового кроветворения.
Цитологическое исследование отпечатков трепанобиоптата костного мозга проводят с целью идентификации диагноза, для качественной и количественной оценки функции костномозгового кроветворения у пациентов с опухолевыми заболеваниями системы крови, анемиями и другими заболеваниями, а также с целью оценки проводимой терапии.
Трепанобиопсия костного мозга выполняется амбулаторно, под местной анестезией. Взятие биоматериала производится иглой Jamshidi в области задневерхней ости правой или левой подвздошной кости. После получения образца ткани на кожу накладывают асептическую повязку, пациент находится под наблюдением врачей 2-3 часа, после чего отправляется домой.
Отпечатки трепанобиоптата получают методом «прокатывания» столбика между двумя предметными стеклами. Препарат высушивается, маркируется и отправляется в лабораторию. В лаборатории отпечатки окрашиваются специальным красителем и анализируются под световым микроскопом.
В норме, состав костного мозга может подвергаться значительным изменениям в зависимости от возраста пациента, функционального состояния костного мозга, а также качества проводимой манипуляции.
Миелограмма – качественное и количественное исследование клеточного состава костного мозга. При подсчете миелограммы определяются клеточность состава, внешний вид клеток (моно/полиморфизм), количество мегакариоцитов, наличие скоплений опухолевых клеток.
При интерпретации миелограммы определяют процентное соотношение всех клеточных элементов отпечатка и морфологическое описание клеток в составе каждого из клеточных рядов.
Миелограмма представляет собой таблицу, в которой все клеточные элементы распределены в соответствии со своими клеточными линиями в зависимости от стадии их созревания
Цитологический анализ отпечатков трепанобиоптата и интерпретация миелограммы являются наиболее значимыми методами определения заболеваний системы кроветворения.
Цитологическое исследование костного мозга что это такое
Когда врач начинает лечить больного с подозрением на лимфому или другую болезнь крови, то ему необходимо понять, в каком состоянии находится очень важный орган пациента, в котором происходит кроветворение – костный мозг. Для этого делаются специальные анализы, о которых мы постараемся рассказать подробнее.
Внутри костей для клеток природой созданы поистине «тепличные» условия, поэтому и вредные (патологические) клетки также стремятся занять «теплое местечко», вот почему исследование костного мозга часто является самым важным для постановки диагноза, а значит, и для правильного лечения.
При взятии костного мозга для анализа, как и при взятии любого другого материала из организма используются принципы максимальной пользы, безопасности и безболезненности. Делают это уже десятки лет, поэтому методики надежно отработаны. Чаще всего используют аспирационную биопсию и трепанобиопсию костного мозга.
Аспирационная биопсия костного мозга
Данная процедура нужна для того, чтобы получить на анализ капельку костного мозга. Эта капелька позволяет быстро и точно понять, что происходит с кроветворением, почему что-то пошло не так, есть ли в костном мозге «вредные» клетки и какие они. Сразу же скажем, что при этом и при других анализах, количество костного мозга очень быстро восстанавливается и организм не терпит никакого урона.
Аспирационную биопсию выполняют так. Врач вместе с пациентом решают, из грудины или со спины брать костный мозг. Если выбирают первый вариант, то протирают спиртом кожу над верхней третью грудины, обезболивают новокаином мягкие ткани и специальной иглой и шприцем берут 0,5 миллилитра костного мозга. Если выбирают второй вариант, то на границе ягодичной и поясничной области, отступив от позвоночника в сторону на 10 см, обрабатывают кожу спиртом и обезболивают мягкие ткани. Затем также специальной иглой берут полмиллилитра костного мозга на анализ. Вся процедура от момента протирания кожи спиртом до окончания в опытных руках занимает времени меньше минуты. Как до, так и после нее можно сразу есть, пить, мыться, словом, заниматься повседневными делами.
Получение капельки костного мозга позволяет провести:
Трепанобиопсия костного мозга
На врачебном языке словом «биопсия» называют взятие жидкой части или кусочка любого органа для исследования, а «трепанобиопсией костного мозга» называется взятие тонкого столбика кости с мозгом внутри для комплексного анализа кроветворных клеток, их взаимодействия с окружающими клетками, изменений структуры кости. Трепанобиопсия костного мозга позволяет обнаружить опухолевые клетки, а также увидеть характерные черты различных заболеваний. Это исследование применяют для того, чтобы уточнить степень заболевания, а иногда только этот анализ позволяет правильно поставить диагноз.
В обычной врачебной работе трепанобиопсию костного мозга делают очень редко, и мало кто знает, что это такое. Именно поэтому кратко опишем, как она делается. Сразу скажем, что во время забора анализа любое прикосновение к любым нервам, позвонкам, спинному мозгу полностью отсутствует. Процедура достаточно простая и может проходить амбулаторно, но делает ее обязательно врач. Пациент может сидеть или лежать в зависимости от своего желания и навыков доктора.
Укажем точки на теле, откуда берут материал. На границе ягодичной и поясничной области, отступив 10 см от позвоночника в сторону, врач находит места, где очень близко к поверхности кожи подходят самые массивные кости человека – подвздошные кости таза. Врач протирает спиртом кожу, тонкой иглой обезболивает мягкие ткани и специальной иглой берет материал. Вся процедура от момента протирания кожи спиртом до получения маленького столбика костной ткани (длиной один-два см) в опытных руках занимает три-четыре минуты. Как до, так и после нее можно сразу есть, пить, мыться, одним словом, заниматься повседневными делами. На месте взятой кости быстро вырастает новая костная ткань. Полученный материал отправляют на гистологическое исследование. При необходимости выполняют углубленное иммуногистохимическое исследование.
Лабораторий, в которых могут квалифицированно проанализировать полученный материал, в городе мало. Кроме того, сама методика анализа очень трудоемкая, поэтому подготовка ответа занимает не менее двух недель.
Исследование клеточного состава (миелограмма)
Капелька костного мозга аккуратно распределяется по стеклышку, окрашивается специальными красками и отправляется в лабораторию. Как правило, микроскопический анализ и написание заключения занимает 1-2 дня. Этот метод относится к одному из самых технически простых, однако специалистов-цитологов, способных правильно оценить то, что видно под микроскопом, в городе очень мало.
Цитогенетическое исследование
Цитогенетическое исследование выявляет болезнь на уровне хромосом.
В школе на уроках биологии мы изучали, что вся информация о человеке зашифрована природой в его генах. Эти гены собраны в особые цепочки, которые спрятаны в ядре клетки. Цепочки генов называются «хромосомами». Цитогенетический анализ хромосом можно провести в момент деления клетки. Анализ возможен только у активно делящихся клеток – стволовых и опухолевых. При некоторых болезнях возникают типичные поломки хромосом, которые можно увидеть в микроскоп, и обнаружение их имеет ключевое значение для диагноза, лечения и предсказания результатов лечения. Для анализа берут около двух миллилитров костного мозга. Цитогенетическое исследование – это очень сложное, трудоемкое дело, которое требует дорогого оборудования, дорогих специальных химических и биологических веществ (реактивов), труда высококвалифицированных лаборантов и врача-цитогенетика. Выполнение такого исследования возможно только в некоторых специализированных больницах и научных центрах. Анализ и написание заключения занимает около 3-4 дней.
Молекулярно-генетические методы исследования (ПЦР и FISH)
Как уже говорилось, в организме человека, как и во всяком живом существе, вся информация зашифрована в генах. У всех людей есть похожие гены (например, те, которые указывают, что у нас одна голова и четыре конечности) и есть непохожие, уникальные (например, те, которые указывают на цвет глаз, оттенок кожи, голос). Для некоторых болезней найдены типичные изменения (мутации) генов, которые вызывают, «запускают» болезнь, и типичные сопровождающие болезнь изменения генов. Чтобы их найти и назначить нужное лечение требуется один-два миллилитра костного мозга больного человека. В некоторых случаях достаточно и крови.
Ученые создали специальные реактивы – белки-ферменты, которые сами находят в исследуемой жидкости нужный ген и делают множество его копий, которые легко обнаружить. Этот метод называется полимеразная цепная реакция (ПЦР). С помощью ПЦР можно обнаружить любой ген – и опухолевый и инфекционный, даже если в организме больного организма опухолевые клетки присутствует в ничтожно малых количествах. Метод очень точен, прост в использовании, но тоже требует чрезвычайно дорогостоящего оснащения (оборудования, реактивов) и труда специалистов. Ответ выдается через 1-2 дня после постановки анализа.
Некоторые гены очень тяжело выявить полимеразной цепной реакцией, тогда на помощь приходит FISH-метод. При FISH-методе используют уже сделанные на заводе светящиеся крупные молекулы настроенные на те гены, которые необходимо обнаружить. Эти молекулы смешивают с кровью пациента, а потом врач лабораторной диагностики по характеру свечения определяет результат. Метод очень точен, однако имеет свои сложности в применении и требует чрезвычайно дорогостоящего оснащения (оборудования, реактивов) и труда высококлассных специалистов. Ответ выдается через 1-2 дня после постановки анализа.
Проточная цитометрия
Чтобы лучше понять этот метод, сравним клетку с плодом киви. Поверхность клетки очень похожа на волосистую кожицу этого фрукта. Волоски клетки – это молекулы-рецепторы, которыми клетки «переговариваются» между собой. По набору этих молекул-волосков можно из многих клеток точно выделять похожие, подобно тому, как по форме одежды можно определить род занятий человека. Опухоль – это множество абсолютно одинаковых клеток, с одним и тем же набором волосков-рецепторов, похожих друг на друга, как солдаты вражеской армии своими мундирами. Используя специальные краски, можно выделить группу одинаковых клеток и с точностью сказать, какая это опухоль, а значит, правильно выбрать лечение и предвидеть его результат.
Как же делается проточная цитометрия? Представим, что можно аккуратно кисточкой покрасить каждый волосок плода киви в свой цвет. Задача фантастически сложная. Тем не менее, с этой задачей справляются врачи-цитометристы, аппараты которых могут в автоматическом режиме за несколько минут покрасить и оценить десятки поверхностных молекул на сотнях тысяч клеток, найти и обозначить больные клетки. При этом метод позволяет исследовать любые клетки в любой жидкости: кровь, костный мозг, плевральную жидкость и т.д. Проточная цитометрия незаменима в диагностике лейкозов и многих других болезней крови, когда необходимо быстро и точно поставить диагноз.
Проточная цитометрия –это очень сложное дело, которое требует дорогого оснащения, труда очень квалифицированного специалиста. Выполняют этот анализ только в некоторых больницах. Несомненный плюс данной методики в том, что можно исследовать любой жидкий материал, что она быстрая и высочайше точная. Анализ и написание заключения занимает 1-2 дня, но сложные случаи могут потребовать больше времени.
Гистологическое исследование
При гистологическом исследовании врач-патологоанатом изучает материал на клеточном уровне. Для этого взятый при биопсии кусочек органа или ткани специальным образом обрабатывают, делают тончайшие срезы и смотрят под микроскопом. При многих заболеваниях имеются типичные изменения в тех или иных органах, поэтому иногда достаточно только гистологического анализа, чтобы точно поставить диагноз. Если же врач обнаруживает изменения, похожие на опухолевые, то для более точного диагноза необходимо дополнительное проведение иммуногистохимического исследования.
С помощью гистологического исследования костного мозга можно ответить на многие вопросы. Например, при необъяснимом уменьшении количества каких-то клеток крови (тромбоцитов, лейкоцитов, эритроцитов) это единственный метод, который позволяет с вероятностью 100% исключить поражение костного мозга лимфомой или другим опухолевым процессом. Этот метод позволяет выяснить, правильно ли происходит кроветворение или есть в нем какие-либо нарушения. Гистологическое исследование незаменимо для выявления поражения костного мозга, например, метастазами, болезнями крови, инфекцией. В связи с длительной лабораторной обработкой материала для анализа время до выдачи результата составляет не менее двух недель.
Иммуногистохимическое исследование
Суть данного метода в целом близка методу проточной цитометрии. С помощью специальных красок и приборов окрашиваются молекулы на поверхности клеток, и врач-патологоанатом изучает результат. Различия состоят в том, что в данной ситуации исследуют не жидкую часть, а твердые кусочки тканей и органов, взятые при биопсии. Этот метод тоже высокотехнологичен, дорогостоящ и требует работы специалиста высокого класса. Немногие лечебные центры способны качественно выполнять данное исследование.
