Правила забора и хранения крови для иммунологических исследований
Общие правила при подготовке к исследованию крови: желательно соблюдать эти правила при проведении биохимических, гормональных, гематологических тестов, комплексных иммунологических тестов, результаты зависимы от физиологического состояния человека.
Кровь забирать в специальную коммерческую вакуумную систему-вакутайнеры, без антикоагулянта, с КРАСНОЙ КРЫШКОЙ!
1. Забор крови производится утром, натощак, венопункцией локтевой вены в специальную коммерческую вакуумную систему, без антикоагулянта, не менее 9-10 мл, если назначено более 5 видов исследований — забирать кровь в 2 пробирки.
2. В некоторых случаях допускается забор крови через 2-3 часа после последнего приема пищи.
3. Строго натощак берется кровь на исследование функции щитовидной железы.
4. Обязательно указать на бланке день менструального цикла пациентки, при заборе крови на исследование гормонов репродуктивной функции.
5. Забор крови на ПСА-общ. и ПСА-своб. проводить строго до ректального осмотра и УЗИ пациента.
6. Забор крови, для определения гомоцистеина, производить в холодную пробирку — вакутайнер и доставлять, немедленно, в лабораторию.
7. Сроки забора крови на биохимический скрининг врожденной патологии плода:
Расчет риска врожденной патологии плода производится компьютерной программой «PRISCА» с учетом данных, которые необходимо отметить в направлении:
— ФИО пациентки
— ФИО врача
— Дата рождения (дата, месяц, год)
— Вес пациентки (определяют перед забором крови)
— Курение (ДА,НЕТ)
— Диабет (ДА,НЕТ)
— Расовая принадлежность (европ.,азиатск.)
— ЭКО беременность (ДА,НЕТ)
— Врач УЗИ
— Дата УЗИ
— КТР, БПР, NT- величина шейной складки плода
— Срок беременности, на момент УЗИ
— Дата забора пробы
— Срок беременности,на момент забора пробы
8. Все пробирки с кровью, до исследования, хранить в холодильнике при температуре +4 С — +8С
9. Кровь для исследований на: гормоны, онкомаркеры, скрининги 1,2 триместра беременности, аутоиммунные заболевания, гуморальный иммунитет, индивидуальные аллергены, должна быть доставлена в лабораторию в день забора крови.
10. Кровь для исследований на инфекции, допускается хранить, до исследования, в холодильнике при температуре +4 С — +8С не более 12 часов.
11. Максимальный срок хранения сыворотки при температуре +4 С- +8С — 48 часов.
13. Допускается только однократная разморозка сыворотки в день исследования.
При какой температуре можно хранить образцы крови для гематологического исследования
Взятие, доставка и хранение биоматериалов для исследования в клинико-диагностической лаборатории (памятка пациента)
Уважаемые пациенты!
Помните, что получение достоверных результатов анализа предполагает правильный сбор материала. Несоблюдение правил подготовки к сдаче материала для исследования, в лучшем случае, приведёт к необходимости повторения анализа, в худшем – к неправильной постановке диагноза со всеми вытекающими отсюда последствиями. Поэтому, перед тем, как сдавать анализы, внимательно ознакомьтесь с соответствующими разделами данной памятки. Память человеческая несовершенна, поэтому перед визитом в поликлинику не поленитесь заглянуть на эту страничку.
ИССЛЕДОВАНИЕ МОЧИ
Правила сбора мочи
Анализ мочи производится не позднее 2-х часов после получения материала. Моча, которая хранится дольше, может быть загрязнена посторонней бактериальной флорой. При этом рН мочи будет сдвигаться к более высоким значениям из-за аммиака, выделяемого в мочу бактериями. Микроорганизмы потребляют глюкозу, поэтому при глюкозурии можно получить отрицательные или заниженные результаты. Желчные пигменты разрушаются при дневном свете. Хранение мочи ведет к разрушению в ней эритроцитов и других клеточных элементов. Перед сдачей мочи на анализ нежелательно применение лекарственных веществ, т.к. некоторые из них (в частности, аскорбиновая кислота, входящая в состав большинства комплексных витаминных препаратов) оказывают влияние на результаты биохимических исследований мочи. Транспортировка мочи должна производиться только при положительной температуре, в противном случае выпадающие в осадок соли могут быть интерпретированы как проявление почечной патологии, либо совершенно затруднят процесс исследования.
Общий анализ мочи (ОАМ)
Для общего анализа предпочтительно использовать “утреннюю” мочу, которая в течение ночи собирается в мочевом пузыре; это снижает естественные суточные колебания показателей мочи и тем самым более объективно характеризует исследуемые параметры. Объём мочи для полного исследования – 30 мл и более. Моча должна быть собрана после тщательного туалета наружных половых органов в сухую, чистую, хорошо отмытую от чистящих и дезинфицирующих средств посуду. Для анализа нужно собрать всю мочу, и перелить в емкость от 30 до 100 мл. Посуда с мочой плотно закрывается крышкой и доставляется в лабораторию.
Исследование мочи по Нечипоренко.
Исследуется утренняя порция мочи в середине мочеиспускания (“средняя порция” мочи). Достаточно 15-25 мл.
Исследование мочи по Зимницкому.
Проба Зимницкого производится в 8-ми отдельных порциях мочи, собранных в течение суток. Перед началом сбора мочи в 6 ч утра больной опорожняет мочевой пузырь (эту мочу выливают). В 9 ч утра больной мочится (это первая банка, содержащая мочу за период с 6 до 9 ч.), в дальнейшем сбор мочи продолжают производить с интервалом 3 часа (после 9 ч и до 12 ч – во вторую банку, с 12 до 15 ч. – в третью … с 3 до 6 утра – в восьмую). Ночью пациента следует будить каждые 3 ч, чтобы он мог помочиться. Сбор мочи заканчивают в 6 ч утра следующего дня. На все ёмкости наклеиваются этикетки с указанием номера и интервала времени, когда была получена данная порция (чтобы не перепутать банки, лучше это сделать предварительно, до начала сбора мочи). Ёмкости до исследования хранятся на холоде.
Свободная мочевая проба.
На протяжении суток пациент мочится столько раз, сколько в этом появляется необходимость. Каждая порция мочи с указанием времени получения приносится в лабораторию, где исследуется как отдельный анализ. Полученную мочу следует хранить в прохладном месте, но не допускать замерзания! Оптимальное место хранения – нижняя полка холодильника.
Бактериологическое исследования мочи (“посев на стерильность”)
Наружные половые органы следует обмыть кипячёной водой, т.к. попадание антисептических растворов в мочу может дать ложноотрицательные результаты. Для бактериологического исследования мочу из средней порции собирают в стерильную посуду.
Количественное исследование содержания сахара в суточной моче.
Необходимо собрать суточную мочу – т.е. всю мочу за одни сутки. При этом ёмкость с мочой необходимо сохранять в прохладном месте (оптимально – в холодильнике не нижней полке – при 4-80С), не допуская её замерзания. При большом количестве суточной мочи допустимо транспортировать в лабораторию только часть её. Предварительно пациент максимально точно измеряет суточный объём мочи, записывает его в направлении врача, а затем, тщательно перемешав, отливает 50-100 мл от общего объёма в чистую ёмкость, после чего доставляет в мочу лабораторию вместе с направлением. При сахарном диабете возможно также определения сахара в моче собранной, в фиксированные (назначенные врачом) промежутки
ИССЛЕДОВАНИЕ КРОВИ
Общий анализ крови
Исследование производится утром натощак. Не рекомендуется сдавать кровь после физической нагрузки, применения медикаментов, особенно при внутримышечном или внутривенном введении их. Не следует сдавать кровь после воздействия рентгеновских лучей (“рентген”), физиотерапевтических процедур. С учётом суточных ритмов изменения показателей крови образцы для повторных исследований целесообразно брать в одно и то же время.
Биохимические анализы крови
Обязательным требованием является режим полного отказа от пищи в день сдачи крови для анализа (вечером предшествующего дня рекомендуется необильный ужин). Противопоказана интенсивная физическая работа, следует избегать стрессовых ситуаций. Влияние различных лекарственных средств на биохимические показатели состояния организма настолько многообразны, что рекомендуется отказаться от приёма лекарственных веществ перед сдачей крови на исследование. Если же отмена лекарства невозможна, необходимо информировать лечащего врача о том, какие вещества применялись в терапевтических целях; это позволит ввести условную поправку к результатам лабораторного исследования.
Пациент в течение нескольких дней (до недели) находится на обычной диете, без ограничения и без избытка углеводов и жиров. За три дня взятия пробы отменяются инъекции глюкозы, кофеина, адреналина. ГТТ производится только при наличии предварительных результатов определения глюкозы натощак, без нагрузки. Для анализа необходимо принести 75 г. глюкозы (выписывается направившим врачом и приобретается в аптеке). Исследование производится троекратно с интервалом в 1 ч, поэтому в лабораторию следует явиться к 800.
Проводят в сыворотке крови. Для определения холестерина, липопротеидов, фосфолипидов кровь берут после 12-14 часового голодания. За две недели до исследования необходимо отменить препараты, понижающие уровень липидов в крови, если не ставится цель определить гиполипедемический эффект терапии этими препаратами.
Исследование мочевой кислоты.
Необходимо в предшествующие исследованию дни соблюдать диету – отказаться от употребления в пищу богатой пуринами пищи – печени, почек, максимально ограничить в рационе мясо, рыбу, кофе, чай. Противопоказаны интенсивные физические нагрузки.
Исследование обмена желчных пигментов
Это определение билирубина его фракций. Перед определением не рекомендуется принимать аскорбиновую кислоты и больной не должен принимать лекарств или продуктов, вызывающих искусственную окраску сыворотки (морковь, апельсины). Гемолиз недопустим.
ЦИТОЛОГИЧЕСКОЕ ГИНЕКОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ
ИССЛЕДОВАНИЕ КАЛА
Копрологического исследования кала (копрограмма)
Для исследования собирают свежевыделенный кал в негерметичную (чтобы не допустить газообразования) ёмкость. При проведении копрологического анализа специальной подготовки не требуется, но при показаниях – врачом назначается пробная диета, которую пациент соблюдает 4-5 дней. На исследования нельзя направлять кал после клизмы, введения свечей, приёма касторового и вазелинового масла, железа (при анемиях), висмута (препараты “Викалин”, “Викаир” и др.), бария (при рентгеновском обследовании), веществ с красящими свойствами. Кал не должен содержать посторонних примесей, например – мочи.
Кал на «скрытую кровь»
При проведении качественной пробы на наличие крови в кале необходимо за 3-4 дня исключить из пищевого рациона больного мясо, рыбу, яйца, все виды зелёных овощей, помидоры.
Кал на яйца гельминтов (на яйца глистов)
Исследование производится в свежевыделенных фекалиях. Для этого из разных участков разовой порции отбирают 10-15 г. кала в чистую ёмкость (см. копрологическое исследование). Кроме того, в лабораторию доставляют самопроизвольно вышедшие или выделенные при лечении паразиты.
Соскоб на энтеробиоз (яйца остриц)
делают утром до дефекации (у женщин и до мочеиспускания) или вечером (через 2-3 ч после того, как больной лёг спать). Соскабливание осторожно производят с поверхности складок в окружности ануса и с нижних отделов прямой кишки посредством деревянного шпателя, смоченного 50% раствором глицерина или 1% раствором двууглекислого натрия. Шпатель с соскобом опускают в пузырёк с 2-3 каплями 80% глицерина, укрепляют резинкой и направляют в лабораторию. Соскобы (спичкой или деревянным шпателем, смоченным 50% раствором глицерина) можно проводить и под ногтями.
Кал на дизбактериоз
Материал для исследования на дизбактериоз должен быть собран в стерильную посуду, желательно одноразового использования. Количество фекалий, присылаемых для исследования, должно быть не более 5 г. и не менее 3 г. Желательно доставить материал не позже, чем через 2 часа после забора материала.
Кал на лактазную недостаточность
Правила забора материала для общеклинических и биохимических исследований крови
Общие правила при подготовке к исследованию крови: желательно соблюдать эти правила при проведении биохимических, гормональных, гематологических тестов, комплексных иммунологических тестов, результаты зависимы от физиологического состояния человека.
Биохимические исследования
Забор крови для биохимических исследований производится натощак венопункцией локтевой вены в вакуумную пробирку с красной крышкой, для исследований глюкозы — в пробирку с серой крышкой. Для таких исследований как глюкоза, тест толерантности к глюкозе, липидный спектр (холестерин, триглицериды, альфа — холестерин) обязательно 12-часовое голодание. Кровь может храниться в холодильнике при температуре +4 — +8 С 12 часов.
Гематологические исследования
Забор крови для гематологических исследований желательно проводить утром натощак венопункцией локтевой вены в вакуумную пробирку с сиреневой крышкой.
Кровь может храниться в холодильнике при температуре +4 — +8 С 6 часов.
Коагулогические исследования
Забор крови для коагулогических исследований проводится в процедурном кабинете строго натощак с 8 до 10 часов утра понедельник-пятница, и с 9 до 10-30 по выходным.
Изосерологические исследования
Забор крови для серологических исследований ( группа крови, резус-фактор) производится натощак венопункцией локтевой вены в вакуумную пробирку с сиреневой крышкой. Кровь может храниться в холодильнике при температуре +4 — +8 С 12 часов.
Исследование мочи
Нельзя допускать:
1. Накануне нежелательно принимать лекарственные вещества, в том числе витамины, жаропонижающие и болеутоляющие препараты могут оказать влияние на результаты биохимических исследований (при необходимости приёма лекарств посоветуйтесь с врачом)
2. Не допускать замораживания мочи при транспортировке.
3. Накануне не стоит «налегать» на минеральную воду — может измениться кислотность мочи.
4. Необходимо ограничить употреблении сладостей и продуктов, имеющих яркую окраску.
5. Избегать накануне сильных физических нагрузок, так как у некоторых людей это может привести к появлению белка в моче.
6. Не хранить более 3-х часов перед сдачей анализа в лабораторию.
7.Нельзя собирать мочу во время менструации, нельзя допускать попадания выделений из половых органов в ёмкость для сбора мочи.
Правила сбора анализов мочи у детей.
Для сбора общего анализа мочи подходит только утренняя моча. Нельзя собирать мочу вечером, так как это ощутимо снижает достоверность результата. «Утренняя» моча, которая в течение ночи собирается в мочевом пузыре; это снижает естественные суточные колебания показателей мочи и тем самым более объективно характеризует исследуемые параметры. Перед сбором мочи ребенка нужно подмыть, причем при подмывании девочки, вода должна стекать спереди назад, чтобы предотвратить занос микрофлоры из перианальной области – зоны, расположенной вокруг выходного отверстия прямой кишки. Подмывая мальчика нужно открыть и обмыть головку полового члена, но делать это можно только в том случае, если отсутствует так называемый «физиологический фимоз» (состояние при котором не открывается головка полового члена) и головка свободно выводится из крайней плоти. Открывать головку насильно нельзя, это может привести к травме! Посуда, в которую вы будете собирать мочу, должна быть простерилизована. Для этого достаточно хорошо помыть баночку, а затем прокипятить или держать над паром 15 минут или использовать малый контейнер для сбора анализа мочи. Значительно упрощают процедуру сбора мочи у маленьких детей одноразовые детские мочеприёмники, купить которые можно в любой аптеке.
У мальчика мочу можно собирать в презерватив или прямо в баночку.
Для сбора мочи у девочки необходимо простерилизовать блюдце, согреть его под теплой водой, положить на него малышку, после мочеиспускания, мочу перелить в заранее приготовленную емкость. Всё время, которое проходит между сбором мочи и доставкой её в лабораторию, анализ следует хранить в тёмном, прохладном месте, в дверце холодильника. С момента сбора мочи до доставки ее в лабораторию должно пройти не более 3-х часов.
Нельзя допускать:
1. Накануне нежелательно принимать лекарственные вещества, в том числе витамины (при необходимости приёма лекарств посоветуйтесь с врачом).
2. Не допускать замораживания мочи при транспортировке.
3. Не хранить более 3-х часов перед сдачей анализа в лабораторию.
8.Нельзя брать мочу из судна и горшка.
Помните, что получение достоверных результатов предполагает правильный сбор материала для анализа. Несоблюдение правил подготовки к сдаче материала для исследования, в лучшем случае, приведет к необходимости повторения анализа, в худшем — к неправильной постановке диагноза со всеми вытекающими отсюда последствиями. Поэтому, внимательно ознакомьтесь с данной памяткой.
Проба Зимницкого: в течение суток каждые 3 часа (8 раз) собирается моча в одноразовые контейнеры, которые хранятся в холодильнике, либо в другом прохладном месте.
По окончании сбора (последнее мочеиспускание производится в тоже время, которое отмечено как время первого мочеиспускания, но через сутки) мочу можно сдать в лабораторию двумя способами:
Моча по Нечипоренко. Сдается средняя порция свободно выпущенной утренней мочи в одноразовый мочевой контейнер после тщательного туалета наружных половых органов.
Исследования кала
Кал собирается после самопроизвольной дефекации в специально предназначенный контейнер. Допустимо фекалии забирать из предварительно продезинфицированного сухого горшка или подкладного судна. Пробу в количестве 1 грамма (примерно) отдельным наконечником с аэрозольным барьером или одноразовыми лопатками переносят в специальный стерильный флакон.
Собирать кал для исследования следует утром. Если это затруднительно, можно подготовить пробу заранее, но не более чем за 8 часов перед сдачей кала в лабораторию. В этом случае следует хранить пробу в холодильнике (не замораживать). Если планируется исследование кала на наличие скрытой крови, то за три дня исключить из рациона мясо, рыбу, зеленые овощи и помидоры.
Нельзя допускать:
1. Нельзя проводить исследования кала раньше чем через 2 дня после клизмы, рентгенологического исследования желудка и кишечника, колоноскопии.
2. Нельзя накануне принимать лекарственные вещества в том числе:
-слабительные; активированный уголь;
— препараты железа, меди, висмута;
— использовать ректальные свечи на жировой основе.
3. Не допускать попадания в образец мочи или воды.
4. Проводить исследование кала у женщин во время менструации
Кал на копрограмму собирается после соблюдения диеты Певзнера в течение 3-4-х дефекаций: 400г. Хлеба, 250 г. мяса, 100г. масла, 40г. сахара, гречневая и рисовая каша, картофель, салат, квашеная капуста, компот из сухофруктов, свежие яблоки — на 1 день.
Требования к условиям и процедурам взятия образцов биологического материала
Взятие биологического материала для выполнения лабораторных исследований должно быть проведено до лечебных или диагностических процедур (оперативные вмешательства, инъекции, вливания, переливания, пункции, биопсии, массаж, эргометрия, диализ, введение рентгеноконтрастных средств, иммуносцинтиграфия, ионизирующее излучение, эндоскопическое исследование) или отложено на тот или иной период времени, зависящий от длительности последействия лечебной или диагностической меры.
При возможности за 2-3 дня до исследования следует исключить прием лекарственных средств, способных повлиять на результаты назначенного теста in vivo или in vitro. Если отмена лекарств нежелательна, следует их возможное влияние учитывать при интерпретации результатов исследования. В бланке назначения должны быть указаны принимаемые пациентом лекарства, если они могут влиять на результаты лабораторных исследований. При проведении лабораторных исследований на фоне лекарственной терапии, взятие образца биологического материала должно быть произведено до приема очередной дозы препарата.
Для подавляющего большинства лабораторных исследований используются пробы крови, в некоторых случаях (биохимические, гормональные исследования) – мочи, значительно реже пробы других биологических материалов.
Пробы крови
Взятие крови. Кровь для исследования следует брать в положении «сидя», из локтевой вены, наложение жгута не долее 30-60 сек. Для исследований используют сыворотку или плазму крови. Характеристику образцов, условия их взятия, также как и вид антикоагулянта, необходимый для получения плазмы крови в данном исследовании, определяет инструкция производителя реагентов.
При плановых исследованиях кровь следует брать натощак (после примерно 12 часов голодания и воздержания от приема алкоголя и курения) между 7 и 10 часами утра, при минимальной физической активности непосредственно перед взятием (в течение 20-30 мин.), в положении пациента лежа или сидя. Для определения концентрации или активности многих аналитов взятие крови может быть выполнено в любое время суток, но лучше проводить его после 12-16 часов голодания для предотвращения мешающей определению опалесценции сыворотки крови, обусловленной высокой концентрацией триглицеридов (постпрандиальная липемия).
Пробы мочи
Для лабораторных исследований используется либо суточная, либо порционная (утренняя) моча. Во время сбора суточной мочи следует точно соблюдать 24-часовой период ее сбора, материал необходимо хранить в холодильнике, в некоторых случаях добавляют соответствующий консервант или стабилизатор.
При какой температуре можно хранить образцы крови для гематологического исследования
Сведения о стандарте
1. Разработан Лабораторией проблем клинико-лабораторной диагностики Московской медицинской академии им. И.М. Сеченова Росздрава, кафедрой биохимии Российской медицинской академии последипломного образования Росздрава.
2. Внесен Техническим комитетом по стандартизации ТК 466 «Медицинские технологии».
3. Утвержден и введен в действие Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии №554-ст от 18 декабря 2008 г.
1. Область применения
Настоящий стандарт устанавливает требования к условиям и процедурам ведения преаналитического этапа клинических лабораторных исследований с целью исключения или ограничения влияния эндогенных, экзогенных, ятрогенных и иных факторов, мешающих правильному отражению состояния внутренней среды обследуемых пациентов в результатах клинических лабораторных исследований.
Настоящий стандарт может использоваться всеми организациями, учреждениями и предприятиями, а также индивидуальными предпринимателями, деятельность которых связана с оказанием медицинской помощи.
2. Нормативные ссылки
В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие национальные стандарты:
ГОСТ Р ИСО 15189-2006. Лаборатории медицинские. Специальные требования к качеству и компетентности.
ГОСТ Р ИСО 15190-2007. [*] Лаборатории медицинские. Требования к безопасности.
3. Правила ведения преаналитического этапа клинических лабораторных исследований
3.1. Общие положения
Достоверность отражения в результатах лабораторных исследований состояния внутренней среды пациента, содержания искомых компонентов биологических материалов в значительной степени зависит от условий, в которых пациент находился в период, предшествовавший взятию у него образца биоматериала, от условий и процедур взятия образца, его первичной обработки и транспортирования в лабораторию, то есть от факторов преаналитического этапа клинического лабораторного исследования.
С целью исключения или ограничения влияния внелабораторных факторов преаналитического этапа на результаты лабораторных исследований настоящий стандарт регламентирует:
а) условия периода, предшествующего взятию у пациента образца биологического материала (приложение А); 
б) условия и процедуры взятия образца биологического материала у пациента;
в) процедуры первичной обработки образца биологического материала;
г) условия хранения и транспортирования образцов биоматериалов в клинико-диагностические лаборатории.
Требования стандарта основаны на:
а) научных данных о постоянных и переменных факторах физического, химического и биологического характера, способных оказать влияние на содержание веществ и клеток в биологических материалах пациентов;
б) обобщенных данных о стабильности компонентов в образцах биологических материалов после их взятия при различных условиях хранения (приложения Б, В, Г); 
в) обобщенных данных о влиянии принимаемых пациентом лекарственных средств на результаты лабораторных исследований (приложение Д); 
г) требованиях ГОСТ Р ИСО 15189 (раздел 5.4).
Правила предназначены для обеспечения такого качества ведения преаналитического этапа клинических лабораторных исследований, которое необходимо для получения их результатов, достоверно отражающих состояние внутренней среды обследуемых пациентов в момент обследования, путем:
— правильной подготовки пациентов к проведению лабораторных тестов;
— информирования пациентов о требуемых ограничениях в диете, физической активности, курении, о правилах сбора биологических материалов, которые обычно собирает сам пациент (моча, кал);
— инструктирования персонала, участвующего во взятии образцов биологических материалов у пациентов, об особенностях процедур взятия различных видов этих материалов;
— рациональной организации процесса взятия образцов биоматериалов;
— полноценного обеспечения процедур взятия образцов биоматериалов необходимыми инструментами, посудой, средствами первичной обработки и транспортировки.
Принимая во внимание потенциальную биоопасность образцов биологического материала, получаемого от пациентов, персонал, выполняющий эти функции, должен быть информирован и обучен правилам безопасного взятия образцов и должен располагать средствами защиты (перчатки, устройства для безопасного сбора использованных игл и т.п.) в соответствии с требованиями ГОСТ Р ИСО 15190.
Настоящие правила содержат общие положения, которые по отношению к отдельным биологическим материалам и отдельным изучаемым в них аналитам, биологическим объектам могут требовать особых условий и процедур, что должно быть отражено в нормативных документах по технологиям оказания соответствующих простых или комплексных медицинских услуг применительно к функциям различных категорий клинического персонала.
На основании этих общих правил в каждой медицинской организации следует разрабатывать и вводить для обязательного исполнения внутренние правила ведения преаналитического этапа применительно к каждому виду исследований, выполняемых в лаборатории, учитывающие особенности медицинского профиля и организационной формы учреждения. В случае выполнения исследований в лаборатории другого учреждения правила ведения преаналитического этапа, включая условия транспортирования образцов, применительно к этим исследованиям следует согласовывать с руководителем лаборатории, выполняющей эти исследования. Наличие и исполнение персоналом правил ведения преаналитического этапа лабораторных исследований является одним из обязательных условий при сертификации процессов выполнения исследований в клинико-диагностической лаборатории.
3.2. Требования к условиям и процедурам взятия образца биологического материала
Для исследования аналитов в цельной крови, сыворотке или плазме образец крови берут чаще всего из локтевой вены. Показания для взятия крови из пальца на клиническое исследование крови:
— при ожогах, занимающих большую площадь поверхности тела пациента;
— при наличии у пациента очень мелких вен или когда они труднодоступны;
— при выраженном ожирении пациента;
— при установленной склонности к венозному тромбозу;
При взятии образца крови из венозного или артериального катетера, через который проводилось вливание инфузионного раствора, катетер следует предварительно промыть изотоническим солевым раствором в объеме, соответствующем объему катетера, и отбросить первые 5 мл (миллилитров) взятой из катетера крови. Недостаточное промывание катетера может привести к загрязнению образца крови препаратами, вводившимися через катетер. Из катетеров, обработанных гепарином, нельзя брать образцы крови для исследований системы свертывания крови.
В зависимости от назначенного вида исследования образец крови должен собираться при наличии строго определенных добавок [1]. Для получения плазмы кровь собирают с добавлением антикоагулянтов: этилендиаминтетрауксусной кислоты, цитрата, оксалата, гепарина [2]. Для исследований системы свертывания крови применяется только цитратная плазма (в точном соотношении одной части 3,8%-ного (0,129 моль/л) раствора цитрата натрия и девяти частей крови). В большинстве гематологических исследований используют венозную кровь с солями этилендиаминтетрауксусной кислоты (ЭДТА, К2 или К3-ЭДТА). Для получения сыворотки кровь собирают без антикоагулянтов. Для исследования глюкозы кровь собирают с добавлением ингибиторов гликолиза (фтористого натрия или йодоацетата).
Для исследования ряда нестабильных гормонов (остеокальцина, кальцитонина, адренокортикотропного гормона) используют ингибитор апротинин.
Для получения из образцов крови вариантов проб для различных видов исследований рекомендуется следующая последовательность наполнения пробирок:
С целью сохранения в образце крови эритроцитов применяют смесь антикоагулянтов с добавками, например, АЦД (антикоагулянт-цитрат-декстроза, или кислота-цитрат-декстроза).
Во избежание ятрогенной анемизации пациентов объем забираемой для исследований крови должен быть рационально рассчитан, исходя из того, что в конечном итоге непосредственно для анализа расходуется лишь половина от первоначально взятого объема (с учетом использования сыворотки или плазмы при гематокрите 0,5).
При использовании современных анализаторов достаточны следующие объемы образцов:
— для биохимических исследований: 4-5 мл; при использовании гепаринизированной плазмы: 3-4 мл;
— для гематологических исследований: 2-3 мл крови с ЭДТА;
— для исследований свертывающей системы: 2-3 мл цитратной крови;
— для иммуноисследований, включая исследования белков и др.: 1 мл цельной крови для 3-4 иммуноанализов;
— для исследования скорости оседания эритроцитов: 2-3 мл цитратной крови;
Рационально применение пробирок для взятия крови небольшого объема (4-5 мл) при соотношении диаметра и высоты пробирки 13 на 75 мм. Использование плазмы вместо сыворотки дает увеличение на 15-20% выхода анализируемого материала при одном и том же объеме взятой у пациента крови. Взятие венозной крови облегчается применением вакуумных пробирок. Под влиянием вакуума кровь из вены быстро поступает в пробирку, что упрощает процедуру взятия и сокращает время наложения жгута.
Взятие образца спинномозговой жидкости (СМЖ) производят в строгом соответствии с утвержденной в установленном порядке процедурой и по возможности вскоре после взятия крови для исследований в сыворотке, с результатами которых данные в спинномозговой жидкости сопоставляют.
Желательно использовать сосуд с широкой горловиной и крышкой, по возможности надо собирать мочу сразу в посуду, в которой она будет доставлена в лабораторию. Мочу из судна, утки, горшка брать нельзя, так как даже после прополаскивания этих сосудов может сохраняться осадок фосфатов, способствующих разложению свежей мочи. Если в лабораторию доставляется не вся собранная моча, то перед сливанием ее части необходимо тщательное взбалтывание, чтобы осадок, содержащий форменные элементы и кристаллы, не был утрачен.
При взятии утренней мочи (например, для общего анализа) собирают всю порцию утренней мочи (желательно, чтобы предыдущее мочеиспускание было не позже, чем в два часа ночи) в сухую, чистую, но не стерильную посуду, при свободном мочеиспускании. При сборе суточной мочи пациент собирает ее в течение 24 ч на обычном питьевом режиме [1,5-2 л (литра) в сутки]. Утром в 6-8 ч он освобождает мочевой пузырь (эту порцию мочи выливают), а затем в течение суток собирает всю мочу в чистый сосуд с широкой горловиной и плотно закрывающейся крышкой, емкостью не менее 2 л. Последняя порция берется точно в то же время, когда накануне был начат сбор (время начала и конца сбора отмечают). Если не вся моча направляется в лабораторию, то количество суточной мочи измеряют мерным цилиндром, отливают часть в чистый сосуд, в котором ее доставляют в лабораторию, и обязательно указывают объем суточной мочи.
Если для анализа требуется собрать мочу за 10-12 ч, сбор обычно проводят в ночное время: перед сном больной опорожняет мочевой пузырь и отмечает время (эту порцию мочи отбрасывают), затем больной мочится через 10-12 ч в приготовленную посуду, эту порцию мочи доставляют для исследований в лабораторию. При невозможности удержать мочеиспускание 10-12 ч, больной мочится в приготовленную посуду в несколько приемов и отмечает время последнего мочеиспускания.
При необходимости сбора мочи за два или три часа, больной опорожняет мочевой пузырь (эта порция отбрасывается), отмечает время и ровно через 2 или 3 ч собирает мочу для исследования.
Слюну, представляющую собой либо продукт только одной железы, либо смесь секретов нескольких желез, допускается использовать для исследования ряда гормонов и лекарственных веществ, в том числе для лекарственного мониторинга. Сбор слюны может осуществляться с помощью устройств (тампонов, шариков), состоящих из различных абсорбирующих материалов (хлопка, вискозы, полимеров).
Кал для исследования должен быть собран в чистую сухую посуду с широкой горловиной, желательно стеклянную (не следует собирать кал в баночки и флаконы с узким горлом, а также в коробочки, спичечные коробки, бумагу и т.д.). Следует избегать примеси к испражнениям мочи, выделений из половых органов и других веществ, в том числе лекарств. Если для какого-либо химического определения (например, уробилиногена) нужно точно знать количество выделенного кала, то посуду, в которую собирают испражнения, нужно предварительно взвесить.
3.3. Особенности условий взятия образцов биоматериалов для специальных видов исследований
При взятии образцов для бактериологических исследований особенное внимание должно быть уделено предотвращению загрязнения. Содержимое абсцесса следует набирать через кожу, если это возможно, поскольку ее легче дезинфицировать, чем слизистые оболочки. Жидкий материал предпочтительнее образцов на тампонах. Секрет, содержащий интерферирующие вторичные микроорганизмы, должен быть удален с поверхности открытой раны, затем образец собирают бактериологическим тампоном круговыми вращательными движениями от центра к периферии раны. Объем пробы должен быть насколько возможно большим. Образцы для культуры крови, если возможно, следует собирать в период повышения температуры тела. При подозрении на инфекционный эндокардит следует брать не менее десяти культур крови.
При взятии кожных образцов для микологических исследований соскобы с зон активного поражения берут с помощью скальпеля после тщательной дезинфекции участка кожи. При отложениях на волосах их образцы берут с помощью эпиляционной пипетки или остригают. При поражении ногтей берут их срезы и соскобы с нижней части ногтей. Для обнаружения дрожжей в моче используют случайный образец мочи, для детекции дрожжей или грибков в мокроте предпочтительнее использовать ее утренний образец.
При диагностике паразитарных заболеваний исследуют кровь (для обнаружения плазмодиев, трипаносомы, лейшмании, микрофилярии), кал (для обнаружения лямблии, гельминтов), образцы тканей пораженных органов (для обнаружения Trichinella spiralis larvae, Echinococcus) или самих паразитов (артроподы: клещи, насекомые), мочу (при мочеполовом шистозомозе). ПЦР-анализ может быть проведен в образцах: крови с ЭДТУК и цитратом, высушенной крови (на фильтровальной бумаге), костного мозга, мокроты, жидкости из полости рта, бронхиальной лаважной жидкости, СМЖ, мочи, кала, биопсийного материала, культуры клеток, фиксированной или покрытой (парафинированной) ткани и т.д. Важным условием получения достоверных результатов является предотвращение загрязнения образцов экзогенной дезоксирибонуклеиновой кислотой (ДНК), обычными источниками которой являются волосы и кожа людей, дверные ручки, лабораторная мебель, порошки, реагенты, термоциклер и наконечники пипеток. Идеальным средством создания чистой беспылевой среды служат настольные шкафы с ламинарным потоком профильтрованного воздуха. Взятие образцов для молекулярно-биологических исследований лучше всего проводить в закрытые одноразовые системы, которые должны быть свободны от нуклеаз, для чего подвергаются автоклавированию в токе горячего воздуха. При использовании незакрытых систем для взятия проб следует, по меньшей мере, надевать одноразовые перчатки. Стеклянная посуда должна обрабатываться 1%-ным раствором диэтилпирокарбоната, который тормозит РНКазы. Оставшийся препарат следует тщательно удалить путем автоклавирования посуды и последующей ее обработки жаром при температуре 250 °C в течение 4 ч.
3.4. Процедуры первичной (долабораторной) обработки образцов биологических материалов
3.4.1. Правила оформления направления на лабораторные исследования
Заявки на анализы должны быть согласованы со всеми врачами-специалистами, участвующими в лечении больного, чтобы при венепункции взять материал для всех необходимых исследований и не повторять процедуру. Медицинская сестра должна собрать все заявки данного пациента и дать суммарную заявку на анализы (применительно только к стационару). Если пациент будет переведен в другое отделение, то она также должна предупредить лабораторию об этом, чтобы результаты исследований были направлены в нужное отделение и не утеряны.
В направлении на лабораторные исследования (заявке) должны быть отображены следующие данные:
— дата и время назначения;
— дата и время взятия крови (сбора биологического материала);
— фамилия и инициалы пациента;
— отделение, номер истории болезни, номер палаты;
— время приема последней дозы препаратов, способных повлиять на результат анализа;
— фамилия и инициалы лечащего врача, назначившего исследование;
— перечень необходимых исследований;
— подпись специалиста, проводившего взятие крови или другого биологического материала.
3.4.2. Правила первичной обработки образца биоматериала
Другие процедуры первичной обработки образцов биоматериалов по месту их взятия зависят от общей организации лабораторного обеспечения в данном учреждении. Если процедурные кабинеты расположены в том же здании, что и лаборатория, то контейнеры с образцами следует как можно скорее доставлять в лабораторию, где и будут осуществляться все дальнейшие действия.
Пробы, содержащие инфекционные агенты, следует обрабатывать иначе, чем пробы с относительно небольшим риском инфицирования (подобно большинству проб крови, сыворотки, мочи, кала, тампонам, мазкам и фильтровальным бумажкам).
При необходимости более длительного транспортирования в лабораторию образцы свернувшейся крови (обычно свертывание происходит в течение 30 мин), предназначенные для получения сыворотки, должны быть отцентрифугированы на месте не позднее, чем через 1 ч после взятия образца. Кровь для получения сыворотки или плазмы центрифугируют в течение 10-15 мин при ускорении 1000-1200 g (оборотов в минуту). Цитратную плазму для исследований системы свертывания крови центрифугируют в течение 15 мин при 2000 g; для получения плазмы, свободной от тромбоцитов, центрифугирование длится 15-30 мин при 2000-3000 g. Центрифугирование пробирок с капиллярной кровью выполняется при 6000-15000 g в течение 90 с. Обычно центрифугирование проводят при температуре 20-22 °C. Для отдельных аналитов может требоваться центрифугирование при температуре 4 °C, 6 °C. Мазки крови для дифференциального подсчета лейкоцитов должны быть подготовлены не позднее, чем через 3 ч после взятия образца.
Поскольку нуклеиновые кислоты быстро распадаются, образцы для молекулярно-биологических исследований следует быстро подвергать стабилизации путем инактивации ДНКаз и РНКаз с помощью хаотропных веществ (гуанидин-
Вегетативные формы паразитов можно обнаружить только в свежих образцах кала в течение 40 мин после испражнения при условии его хранения при температуре 4 °C. Цисты стабильны. Для концентрации паразитов и их сохранения в образцах кала обычно применяют растворы мертиолят-йод-формалин и ацетат натрия-формалин.
3.5. Требования к условиям хранения и транспортирования образцов биоматериалов в клиническую лабораторию
Условия хранения образцов биоматериалов, взятых у пациентов, определяются стабильностью в этих условиях искомых аналитов. Максимально допускаемая нестабильность, выраженная в процентном отклонении результата после хранения от исходного уровня, не должна превышать половины размера общей ошибки определения, рассчитываемой из суммы биологической и аналитической вариации данного аналита. Максимально допускаемое время хранения измеряется периодом времени, в течение которого в 95% образцов содержание аналита сохраняется на исходном уровне.
Стабильность аналитов в различных видах образцов (крови, мочи, спинномозговой жидкости) и проб (сыворотке, плазме, осадке, мазке крови) неодинакова [2] (см. приложения Б, В, Г). Данные о стабильности проб следует учитывать и при их хранении после поступления в лабораторию. В отношении аналитов, нестабильных на свету, должны быть соблюдены соответствующие предосторожности (сбор материала в темную посуду, защита образца от прямого света).
Содержание электролитов, субстратов, некоторых ферментов может не изменяться при хранении образцов сыворотки крови при температуре холодильника 4 °C в течение до четырех дней. Гемоглобин, эритроциты стабильны в течение одного дня при хранении в закрытой пробирке. Хранение образцов плазмы крови, предназначенной для исследований свертывающей системы, в условиях комнатной температуры более 4 ч не рекомендуется.
При транспортировании в лабораторию контейнеры с образцами крови следует предохранять от тряски во избежание развития гемолиза. Температура ниже 4 °C и выше 30 °С может существенно изменить содержание в образце многих аналитов. Образцы цельной крови пересылке не подлежат.
3.5.4. Доставка в лабораторию биоматериалов для микробиологического исследования
Доставка в лабораторию любого образца биоматериала, предназначаемого для микробиологического исследования, должна длиться не более двух часов после взятия материала. Даже наиболее совершенная транспортная система не может служить заменой быстрому транспортированию и немедленному исследованию образца. Требования к транспортированию и хранению бактериологических проб приведены в табл. 3. 
Если соблюдение этих условий не может быть обеспечено, рекомендуется инокуляция во флакон для культур крови или в гемофлакон или, например, для проб мочи, использование погружных слайдов.
Образцы для обнаружения и идентификации вирусов должны быть доставлены в лабораторию быстро при температуре 4 °C в отдельном контейнере. В этих условиях вирусы обычно остаютс
