Папилломавирус генотипирование (16,18,31,33,35;39,45,51,52,56,58,59) (качественный метод)
Описание исследования
Папилломавирусная инфекция – это общее название ряда вирусных заболеваний, характерной особенностью которых является образование на поверхности кожи и слизистых оболочек наростов, похожих на бородавки. Инфекции этого ряда хронические, с периодическими рецидивами, очень заразные и широко распространенные. Вызываются заболевания вирусом папилломы человека (ВПЧ), имеющего более 100 известных медицине генотипов. Заражение вирусом происходит, как правило, при половом акте, однако известны случаи инфицирования детей от больных матерей во время родов, а также передачи инфекции при бытовых контактах.
Наиболее вероятно заражение папилломавирусной инфекцией:
Зависимость вероятности инфицирования от количества половых партнеров можно проиллюстрировать следующими данными наблюдений: среди женщин, имеющих одного партнера, количество инфицированных вирусом составляется 17-20%, пяти и более партнеров – порядка 70-80%.
Длительность инкубационного периода ВПЧ может варьироваться от 2 месяцев до 10 лет. Как правило, инфекция протекает бессимптомно. Даже проведение кольпоскопического, цитологического и гистологического обследования могут показывать норму. Скрытую форму инфицирования вирусом папилломы человека можно выявить только методом ПЦР.
Почти у трети пациентов инфекция самопроизвольно исчезает из организма в течение полугода-года (особенно это свойственно молодым людям).
Болезни, вызываемые вирусом папилломы, разнообразны и зависят от его типа. Следствием заражения ВПЧ на определенном этапе может быть поражение среднего слоя эпителия, характеризуемое образованием как бы чешуйчатой трансформации клеток шейки матки. Развитие третьей стадии данного состояния становится возможным только при постоянном пребывании возбудителя инфекции, относящегося к генотипу с высокой онкологической степенью риска. Есть сведения, что наличие таких генотипов в течение 5-10 лет в организме женщин от 30 лет, значительно увеличивает риск возникновения онкологических новообразований шейки матки. Поражение вирусом папилломы человека клеток трофобласта (наружного слоя клеток зародыша) может привести к самопроизвольному аборту.
Следствием инфицирования ВПЧ может быть не только образование раковой опухоли женских половых органов, но и развитие плоскоклеточного рака у представителей обоих полов. Также проведенные исследования доказали непосредственную причастность вируса к появлению:
Эти образования являются доброкачественными и появляются при острой инфекции. Заражение ВПЧ детей чревато развитием папилломатоза гортани.
Причиной инфицирования мужчин в 40-60% случаев являются половые контакты с инфицированной женщиной. При проведении исследования у них обнаруживаются те же генотипы ВПЧ, что и у партнерш. Папилломавирус у лиц мужского пола может проявляться характерными высыпаниями на коже и слизистых оболочках половых органов.
Данное тестирование предназначено для выявления специфических фрагментов ДНК 16, 18, 31, 33, 35; 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59 типов вируса папилломы человека. Исследование проводится методом полимеразной цепной реакции (ПЦР), суть которого заключается в значительном увеличении количества специфических для ВПЧ фрагментов ДНК вируса с наблюдением за процессом в режиме реального времени. Материал, отбираемый для исследования – эпителиальные клетки урогенитального тракта.
Выявление при исследовании генотипов вируса папилломы человека с высокой онкологической степенью риска еще не означает наличие рака, но является показанием для дополнительного проведения гистологического, цитологического исследований и наблюдения за развитием инфекции в динамике.
Важность проведения повторного генотипирования обусловлена следующими аргументами:
1. Присутствие в организме нескольких генотипов вируса папилломы человека является показателем вероятности более тяжелого протекания инфекции с более высоким риском сохранения вируса в активном состоянии;
2. Различные генотипы характеризуются различной степенью канцерогенной активности. Наиболее опасными являются 16 и 18 тип ВПЧ. При обнаружении специфических фрагментов ДНК ВПЧ после теста на широкий спектр типов, необходимо проведение исследование на выявление 16 и 18 генотипов. Подтверждение их наличия является показанием к проведению кольпоскопии. Если при повторном обследовании обнаружены другие генотипы высокого онкологического риска, рекомендуется проведение цитологических исследований, а затем, в случае получения положительного ответа – кольпоскопии.
3. Повторное генотипирование дает возможность определить, что именно имеет место: реинфицирование или персистентная (хроническая) инфекция (в первом случае спектр генотипов изменяется, во втором – генотип остается тот же). Это важно знать, поскольку хроническая форма представляет значительную опасность, в то время как недавнее инфицирование может самопроизвольно излечиться. К тому же повторное заражение одним и тем же генотипом после самопроизвольного излечения практически невозможно.
Получение корректного результата исследования возможно только в том случае, когда отбор пробы эпителиальных клеток урогенитального тракта проведен строго в соответствии с техническими требованиями. Определить это позволяет дополнительный показатель – КВМ (контроль взятия материала), позволяющий выяснить, какое количество специфических фрагментов ДНК вируса попало в пробу с эпителиальными клетками.
Подготовка к исследованию
Цервикальный канал, влагалище
Соскобы у женщин отбираются не ранее пятого дня от начала менструального цикла и не позже пятого дня до предполагаемой даты следующей менструации. Если наблюдаются явные признаки заболевания, отбор пробы проводится непосредственно в день обращения.
Требования по подготовке к тестированию:
Проба не отбирается:
Мочеиспускательный канал (уретра)
У лиц обоего пола проба отбирается не ранее чем через 14 дней после применения антибиотиков местного действия и 30 дней после перорального приема противобактериальных средств.
За неделю до манипуляции рекомендуется прекратить прием всех медицинских препаратов. Если отказ от лечения невозможен, то пациенту необходимо поставить об этом в известность специалиста, направляющего его на обследование.
При отборе эпителиальных клеток из мочеиспускательного канала, манипуляция проводится перед мочеиспусканием, или через 2-3 часа после него (при обильных выделениях из уретры у мужчин – через 1 час).
Показания к исследованию
Интерпретация исследования
Данный тест – качественный. Результат выдается в одной из формулировок: «обнаружено» или «не обнаружено».
Референсное значение – «не обнаружено».
Положительный ответ свидетельствует о наличии в пробе биоматериала специфических фрагментов ДНК вируса папилломы человека 6, 18, 31, 33, 35; 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59 типов, что является показателем высокого риска развития рака шейки матки и других новообразований.
Отрицательный ответ выдается:
Отсутствие в исследуемом материале специфических фрагментов ДНК ВПЧ 6, 18, 31, 33, 35; 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59 типов не исключает возможность инфицирования другими генотипами вируса папилломы человека.
При положительном результате тестирования проводятся дополнительные исследования, что может задержать выдачу окончательного ответа.
Результат теста выдается на бланке лаборатории медицинской компании «Наука». Пример по данному анализу представлен ниже:
Ф.И.О.: Иванов Иван Иванович Пол: м Год рождения: 01.01.0000
Дата исследования: 12.12.0000
Исследование
Результат
Нормы интерпретации
Примечание
[67] [кач.] Папилломавирус генотипирование (6, 18, 31, 33, 35; 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59)
При интерпретации результата анализа необходимо учитывать также показатели гистологического и цитологического исследований.
Литература:
3. Bekkers R., Meijer C., et al. Effects of HPV detection in population-based screening programmers for cervical cancer: a Dutch moment // Gynecol. Oncol. 2006; Mar: 100(3):451-4.
4. Khan M., et al. The elevated 10-year risk of cervical precancer and cancer in women with human papillomavirus (HPV) type 16 or 18 and the possible utility of type specific HPV testing in clinical practice // J. nat. cancer inst. 2005; 97:1072-9.
5. Snijders J., Meijer C. The value of viral load in HPV detection in screening // HPV today 2006; 8:8-9.
Пресс-центр
Какие штаммы ВПЧ самые опасные для женщин?
Вирус папилломы человека есть практически у всех людей на планете. Кому-то он никогда себя не покажет, а у кого-то может вызвать серьезные проблемы со здоровьем. Его коварство заключается в том, что он может находиться в организме человека несколько десятков лет и тихо разрушать здоровье. Мы подготовили важный материал о самых опасных ВПЧ для женщин, как заподозрить неладное, а также какие анализы необходимо сдавать, чтобы не упустить болезнь.
Вирус имеет несколько типов. Для каждого из них характерны поражения определенных участков тела, появления специфических кожных новообразований. Также заболевания, которые вызывают некоторые разновидности вируса, отличаются по степени выраженности клинической картины, особенностям, скорости проявления симптомов.
ВПЧ: что это такое
Вирус папилломы человека относится к хроническим вирусным заболеваниям. Передается он бытовым и половым путем. Этот патогенный микроорганизм становится причиной аномальных разрастаний эпителиальных клеток и провоцирует образование доброкачественных опухолей. Доказано, что изменения, которые вызваны ВПЧ, потенциально опасны, так как могут превратиться в злокачественную опухоль.
Существует более двухсот типов возбудителей. Большинство из них не приводят к серьезным последствиям, никак не проявляют себя в течение жизни. Так, папилломавирус есть в организме 80-90% населения планеты. Большинство из этих людей даже не знают, что инфицированы.
Есть и другая группа, когда в результате заражения на теле появляются бородавки, папилломы или кондиломы. Третий же тип вызывает развитие онкологических заболеваний. ВПЧ 16 и 18 в 70% случаев приводит к раку шейки матки и предраковым патологическим состояниям этого органа.
Длительность латентного периода может быть от пары месяцев до десятилетий. На появление образований на коже и органах влияет сниженный иммунитет.
Специфика развития онкогенных вирусов
Папилломавирус классифицируется по способности вызывать злокачественные образования. Все разновидности можно разделить на 4 группы:
Чаще всего до того момента пока ДНК вируса достигает клеточного ядра здоровой клетки, девушка не ощущает ничего непривычного в работе своего организма. Этот процесс можно описать как «перепрограммирование» клетки. Происходит изменение генетической основы ДНК, и клетка теперь является врагом организма. После запускается рост новообразований на теле или органах.
Для каждого вида свойственно иметь свой штамм. Некоторые из них способствуют слишком быстрому размножению клеточных образований. В результате этого они не успевают созревать до нужной стадии, а это в свою очередь становится причиной появления группы недифференцированных, иными словами, нетипичных для данной болезни, клеток. Они начинают активную секрецию онкогенного белка, а это старт для развития онкологии.
Какую опасность несет папилломавирус
Если своевременно не заняться лечением онкогенной разновидности, а также при присоединении неблагоприятных факторов возможно развитие самых неприятных патологических явлений:
Если на коже появились папилломы, то чаще всего это просто косметическая проблема. Но если наблюдается прорастание в носовых пазухах и вовлекаются в процесс прилегающие ткани, то речь идет о серьезных заболеваниях. Любые папилломы важно вовремя лечить. В ситуации частого травмирования одеждой, их стоит удалять.
О чем должна знать женщина
Вирусы с высокой онкогенностью представляют для девушек особую опасность. Они формируются в группу А-9. Речь идет о следующих типах: 16, 18, 31, 33, 39, 51, 52, 56, 58, 59.
При злокачественных поражениях шейки матки отмечается высокий процент смертности. При этом стремительно растет количество женщин, у которых диагностировали это заболевание, возраст же пациенток стремительно снижается. Среди отягчающих факторов отмечают:
Наибольшую опасность представляют наросты, которые расположились на половых органах. Выявить их, как правило, может только гинекологический скрининг.
Диагностика
Существует несколько методов диагностики. Как правило, к врачу пациент обращается только в тех ситуациях, когда недуг дает о себе знать. Это не правильно. К специалисту следует записаться, как только ты обнаружила новообразования.
Сначала врач проводит визуальный осмотр пациента на наличие на теле бородавок. Далее вирус диагностируется двумя способами:
Как правило, анализ не сдают до 25 лет. Исключением являются случаи, когда девушка начала раннюю половую жизнь. До 30 лет исследование проводят чаще всего совместно с изучением тканей на цитологию. Тестирование рекомендуется проводить один раз в год, если ранее у женщины уже выявили ВПЧ опасного типа. Если же ранее не было диагностировано наличие вируса, планово анализ сдается один раз в пять лет.
Также есть тесты, которые выявляют ВПЧ разных разновидностей. Во время визита в диагностический центр, обрати внимание, какие именно типы включены в анализ. Некоторые лаборатории делают исключительно исследование на 16 и 18 вид, в других же центрах можно встретить исследование всех типов высокого риска.
Для профилактики рака шейки матки тест сдается только в комплексе с цитологическими исследованиями тканей. Помни, что не существует анализа, который бы смог определить, покинет вирус организм или нет. В возрасте от 30 до 49 лет очень важно проходить скрининг на рак шейки матки. Именно это исследование дает возможность обнаружить предраковое состояние и избежать серьезных проблем.
Лечение в зависимости от типа
Терапия назначается только тем женщинам, которые имеют клинические проявления болезни. Схема лечения основывается на двух ключевых моментах:
Существует несколько способов удаления бородавок и папиллом. Все зависит от того, где они расположились, обширность процесса и глубина поражения тканей. В некоторых ситуациях прибегают к хирургическому вмешательству и электрокоагуляции, иногда для удаления используют лазер или химическое прижигание.
В наше время, к сожалению, еще не разработаны препараты, которые бы разрушали онкогенные структуры самого белка ВПЧ. Поэтому терапия основывается на тщательном контроле за развитием новообразований и удалении кожных разрастаний.
Когда выявляется 31 или 16 вид, терапия базируется на комбинированном подходе:
Противовирусные и иммуностимулирующие препараты замедляют, а иногда и прекращают рост, развитие и копирование ДНК вирусов онкогенной группы А-9. Поэтому при выявлении ВПЧ самых опасных типов для женщины очень важно внимательно относиться к рекомендациям врача и не пропускать прием препаратов.
Беременность и вирус
Если беременная девушка обнаружила на теле плоские кондиломы, это прямое показание к биопсии и кольпоскопии. Если вовремя не принять нужных мер, то при ВПЧ 16 типа есть риск при родах заразить младенца.
Кроме этого, девушки, которые планируют зачатие, должны знать, что данный недуг может стать преградой в этом вопросе. Если же женщина забеременела, то есть риск возникновения патологий во время вынашивания ребенка и при родах.
Если ранее у девушки был диагностирован вирус высокого онкогенного риска, то перед тем как зачать ребенка, следует проконсультироваться с гинекологом. Бывают ситуации, когда вирус уже был в организме до родов, но в скрытой форме. Будь готова, что во время беременности он даст о себе знать. Первый признак – появление папиллом.
В любом случае, если ты приняла решение завести ребенка, изначально следует проконсультироваться с врачом и пройти полное обследование. Так, период беременности будет связан только с приятными эмоциями.
Профилактика папилломатоза
Первое правило профилактики заболеваний, который вызывает вирус – регулярное посещение врача. Два раза в год нужно приходить на прием к своему гинекологу. Это даст возможность своевременно выявить папилломы, которые появились на половых органах.
Кроме этого, следует соблюдать несколько правил:
Мы рассмотрели самые опасные ВПЧ для женщин. Теперь ты знаешь, что твое здоровье только в твоих руках. Внимательно прислушивайся к своему организму, регулярно посещай врача и веди здоровый образ жизни.
Вирус папилломы человека ВПЧ и рак шейки матки
Передаются вирусы папилломы человека при половых контактах. С началом половой жизни этим вирусом заражается подавляющее большинство женщин. Следует учитывать, что риск заражения ВПЧ зависит и от количества половых партнёров и от сексуального поведения единственного партнёра (распространенность ВПЧ у мужчин примерно равна распространенности среди женщин).
80% инфицированных женщин вирус уходит из организма самостоятельно, без какого-либо лечения, не вызывая болезней (спонтанная элиминация). И только у небольшого процента женщин с хронической (персистентной) инфекцией, обусловленной высокоонкогенными генотипами ВПЧ, через 10-20 лет может развиться рак шейки матки. Кажется, времени для успешной диагностики и лечения вполне достаточно, но расслабляться не стоит.
Папилломавирусная инфекция очень коварна, и связанные с нею предраковые изменения, как правило, не только не вызывают никакого беспокойства и дискомфорта, но часто и не обнаруживаются при обычном гинекологическом осмотре.
При этом нужно учитывать, что выявление ВПЧ группы высокого канцерогенного риска у женщин не является основанием для постановки диагноза злокачественной опухоли, но служит поводом к дальнейшему обследованию, более интенсивному наблюдению и, при необходимости, лечению предраковых изменений слизистой шейки матки.
Исход ВПЧ-инфекции зависит от генотипа вируса. Все папилломавирусы подразделяются на группы по «вредности» или «онкогенности». ВПЧ-тесты методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) позволяют выявить все распространённые и клинически значимые генотипы ВПЧ.
К группе низкого канцерогенного риска относятся 6, 11 генотипы ВПЧ: они могут быть причиной остроконечных кондилом и дисплазий легкой степени. Анализ на ВПЧ 6 и 11 генотипов применяется для дифференциальной диагностики с заболеваниями не папилломавирусной этиологии и при обследовании беременных для оценки риска развития папилломатоза гортани у новорожденных.
К раку шейки матки чаще всех приводят 16 и 18 генотипы папилломавирусов. Они, вместе с 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59 и 68 типами входят в группу высокого канцерогенного риска. При проведении анализов на вирус папилломы человека именно на эти генотипы нужно обращать особое внимание. Наиболее важен анализ ДНК ВПЧ 16 типа и 18 типа, особенно, если их концентрация («вирусная нагрузка») высока. А онкогенный потенциал 51 и 56 типов не так велик, поэтому они менее опасны, даже если в анализе на ВПЧ присутствуют в относительно большом количестве.
Все дополнительные анализы на вирус папилломы человека и другие исследования должны проводиться по назначению и под контролем врача.
Если поражение слизистой шейки матки выявлено на ранней стадии, предшествующей раку, то лечение более эффективно и практически не имеет побочных эффектов. Если не обнаружено никаких патологических изменений слизистой шейки матки, то и необходимости в лечении нет: вероятнее всего, организм справится с вирусом самостоятельно.
Однако через 1 год необходимо пройти повторное ВПЧ-тестирование и, если вирус все еще присутствует, снова обследоваться у врача-гинеколога.
Анализ на вирус папилломы человека (ВПЧ) методом ПЦР и цитологические исследования.
Основой современных скрининговых программ раннего выявления онкологической патологии шейки матки является цитологическое исследование по Папаниколау (ПАП-тест, окраска по Папаниколау). К сожалению, далеко не во всех российских медицинских учреждениях используется эта методика, очень часто применяются другие, менее совершенные способы приготовления (окраски) цитологического мазка.
Именно поэтому для традиционного цитологического скрининга характерно большое количество ложноотрицательных и неопределенных результатов, требующих повторных исследований.
Молекулярно-биологические методы диагностики ВПЧ-инфекции
Молекулярно-биологические методы предоставляют информацию о развитии ВПЧ-инфекции, но не позволяют судить о наличии заболевания, поскольку факт инфицирования ВПЧ не всегда сопряжен с заболеванием. Два основных метода диагностики ДНК ВПЧ — полимеразная цепная реакция (ПЦР) в режиме реального времени и метод гибридного захвата (Digine-тест). Оба метода практически не отличаются по чувствительности и специфичности, однако, сертифицирован и одобрен FDA только Digene-тест.
Технология Digene-теста основана на гибридном захвате и заключается в уникальном способе связывания вирусной ДНК с РНК-зондом, захвате полученного гибрида моноклональными антителами и хемилюминисцентной детекции образуемых комплексов.
По сути это качественный тест, который применяется для профилактического скрининга для ранней диагностики патологии шейки матки. Тест идентифицует 13 генотипов высокого (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 68) и 5 генотипов низкого риска (6, 11, 42, 43, 44).
Тест одобрен Федеральной службой РФ по надзору в сфере здравоохранения и социального развития (ФСНСЗСР). Digene-тест выявляет клинически значимый уровень инфицирования вирусом папилломы человека, который приводит к развитию неоплазии шейки матки. Положительный результат теста выдается в единицах Digine. Отрицательный тест практически исключает CIN II и CIN III.
Обнаружение ДНК ВПЧ в качественном формате
ДНК ВПЧ длительно сохраняется в образцах тканей, поэтому ее легко можно идентифицировать. Для определения достаточно минимального количества исследуемого образца. «Качественное» определение ДНК ВПЧ имеет спорную клиническую значимость, поскольку указывает только на факт наличия вируса, не позволяя сделать прогноз относительно течения инфекции. В большинстве случаев инфекция элиминируется самостоятельно.
Количественное определение вируса ВПЧ
Количественный анализ ДНК ВПЧ наиболее чувствителен на ранних этапах папилломавирусной инфекции, когда отсутствуют другие признаки инфицирования. Например, цитологические, клинические. Метод количественного определения используется в качестве скрининга, особенно в рамках национальных программ контроля рака шейки матки, а также для оценки эффективности терапии.
Количественные ПЦР-методы направлены на максимальную чувствительность выявления вирусной ДНК, однако, не всегда существуют прямые клинические корреляции.
Одним из критериев клинически значимой инфекции, которая с высокой степенью вероятности способна развиться в неоплазию, рассматривается вирусная нагрузка. Вирусная нагрузка 3 lg на 105 клеток является клинически малозначимой, поскольку сопровождается минимальным риском дисплазии и почти в 100% случаев заканчивается спонтанной регрессией. Вирусная нагрузка больше 5 lg на 105 клеток считается повышенной и сопряжена с высоким риском развития дисплазии. Снижение вирусной нагрузки на 1 lg за 6 месяцев говорит о транзиторной инфекции.
Прогностическая ценность вирусной нагрузки на сегодняшний день однозначно не определена.
Генотипирование вируса методом ПЦР позволяет определить тип вируса ВПЧ и его онкогенность. Этот метод подходит для выявления персистенции ВПЧ и позволяет отличить случаи реинфекции. О реинфицировании говорит изменение спектра генотипов, о персистентной инфекции — сохранение генотипа вируса через год после первого тестирования.
При инфицировании несколькими генотипами ВПЧ одновременно, прогноз течения заболевания менее благоприятный, а риск персистенции и риск развития РШМ по сравнению с инфицированием одним типом более высокий.
Выявление ВПЧ высокого риска свидетельствует о наличие папилломавирусной инфекции. ВПЧ высококанцерогенного риска имеют различный онкогенный потенциал. На долю самых опасных, 16 и 18, приходится около 70% всех случаев цервикального рака. Генотипирование на ВПЧ 16 и 18 позволяет выделить группу женщин, которые имеют повышенный риск развития цервикального рака.
Рекомендации ВОЗ по профилактике рака шейки матки
Цена: 600 руб.
Материал: Урогенитальный соскоб, моча, эякулят
Время забора: 7:00-18:30 сб. 7:00-13:00 вс. 8:00-11:00
Выдача результатов: Через 1 рабочий день
Условия подготовки к анализам:
Не мыться и не мочиться 2 часа.
Тест, направленный на количественное определение ДНК вируса папилломы человека 14 типов высокого онкогенного риска: 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59 в соскобе эпителиальных клеток урогенитального тракта.
Вирус папилломы человека (ВПЧ) может быть причиной возникновения рака гениталий у женщин и плоскоклеточного рака у мужчин и женщин. Доказано, что этот вирус является причиной возникновения остроконечных кондилом, кондилом и новообразований шейки матки. Различные виды ВПЧ являются причиной различных поражений. Некоторые из них являются факторами высокого онкогенного риска.
Аналитические показатели:
Формат выдачи результата включает суммарное количество по всем указанным типам ВПЧ в lg(ВПЧ на 100 тыс. клеток).
Подготовка
Для мужчин: За 1–2 суток до взятия мазка (соскоба) необходимо исключить половые контакты. Не рекомендуется взятие биоматериала на фоне проведения антибактериальной терапии (общей / местной). Нельзя мочиться в течение 1,5-2 часов до процедуры.
Показания
Интерпретация результата
Интерпретация результатов исследования содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т.д.
