Вирус гепатита В, ДНК HBV
Описание
Вирус гепатита В, ДНК HBV, качественный — качественное определение ДНК вируса гепатита В в крови, методом полимеразной цепной реакции (ПЦР), с детекцией в режиме «реального времени».
Метод ПЦР — позволяет идентифицировать в биологическом материале искомый участок генетического материала и обнаружить единичные молекулы ДНК вируса, не выявляемые другими методами. Принцип метода основан на многократном увеличении числа копий специфичного для данного возбудителя участка ДНК.
С помощью ПЦР-анализа можно диагностировать инфекцию в остром периоде и выявлять случаи носительства.
Гепатит В (HBV или ВГВ) — потенциально опасная для жизни инфекция, одно из самых распространенных в мире инфекционных заболеваний печени, вызванное ДНК-содержащим вирусом гепатита В (HBV).
Пути передачи HBV — кровь и или другие жидкости организма инфицированного человека, через слизистые оболочки, повреждения кожного покрова, при незащищенном половом контакте, бытовой путь, использование нестерильных шприцев, переливание крови и пересадка донорских органов, парентеральный путь (от матери к ребенку). Мать, также, может заразить новорождённого через трещины в сосках.
Длительность инкубационного периода от 4 недель до полугода. Гепатит В может протекать как в легкой форме, которая длится несколько недель, так и в виде многолетней хронической инфекции.
Клинические проявления гепатита В
Основные клинические проявления гепатита В: появление слабости, тошнота, снижение аппетита, быстрая утомляемость, лихорадка, желтушность кожных покровов, в лабораторных анализах — нарушения функции печени и специфические антигены вируса гепатита В. Во многих случаях заболевание протекает бессимптомно во время острой стадии инфекции.
Острое заболевание может быстро приводить к летальному исходу, переходить в хроническую инфекцию или заканчиваться полным выздоровлением. После перенесенного ВГВ формируется стойкий иммунитет.
Хронический вирусный гепатит В связан с развитием цирроза и рака печени.
Интерпретация результатов
Тест качественный. Результат выдаётся в терминах «обнаружено» или «не обнаружено».
Количественное определение ДНК вируса гепатита В
Определение концентрации ДНК ВГВ в крови (вирусная нагрузка) при ГВ измеряется в международных единицах на мл (МЕ/мл), может измеряться и в копиях/ мл. Соотношение между копии/МЕ в наборах реагентов разных производителей различно – от 1,5 до 8 (в среднем – 5). В настоящее время границей между высокой и низкой вирусной нагрузкой ВГВ принято считать 2 000 МЕ/мл (10 000 копий/мл).
Определение концентрации ДНК ВГВ в крови используется для определения различных стадий при хронической инфекции, вызванной ВГВ (Табл. 6) и мониторинга эффективности противовирусной терапии (Табл. 7). Поскольку при ХГВ полная эрадикация вируса практически не возможна, целью лечения является снижение риска развития неблагоприятных исходов заболевания (цирроз печени или гепатоцеллюлярная карцинома), что может быть достигнуто при стойком подавлении репликации вируса. Именно поэтому измерение концентрации ДНК ВГВ в крови, которая отражает активность вирусной репликации, становится основным критерием оценки ответа на лечение.
Показания к обследованию
Особенности интерпретации результатов
Диагностика инфицированных ВГВ Вирусная нагрузка в плазме крови в совокупности с другими маркерами позволяет определить стадию хронической инфекции, вызванной ВГВ (Табл.6).
Мониторинг эффективности противовирусного лечения ХГВ Количественное исследование ДНК ВГВ в плазме крови является обязательным исследованием до начала и в процессе противовирусного лечения для оценки его эффективности. В зависимости от полученных результатов (Табл. 7) терапия выбранным препаратом продолжается, или проводится корректировка схемы лечения.
Маркеры гепатита В (HBeAg, anti-HBcoreM, anti-HBe, Anti-HBcore)
Гепатит В – острое или хроническое заболевание печени, вызываемое вирусом гепатита В (HBV), протекающее в различных клинических вариантах: от бессимптомных форм до злокачественных (цирроз печени, гепатоцеллюлярная карцинома). На долю ГВ приходится около 15% всех регистрируемых в РФ острых гепатитов и не менее 50% хронических.
Схематично строение вирусной частицы гепатита В можно изобразить так:
Рис.1. Структура вируса гепатита В.
Белок внешней оболочки ВГВ является его поверхностным антигеном – HBsAg. HBsAg – это основной маркёр ГВ. При остром гепатите HBsAg может быть выявлен в крови обследуемых уже в инкубационный период в первые 4–6 недель от начала клинического периода. Присутствие HBsAg более 6 мес рассматривается как фактор перехода болезни в хроническую стадию.
Следует отметить, что только часть HBsAg, образующегося при размножении вируса, используется для построения новых вирусных частиц, основное же его количество поступает в кровь инфицированных лиц, где и определяется HBsAg- антиген.
Это четвертый маркер активной репликации вируса наряду с ДНК, HBs Ag и антиHBc –IgM.
Исчезновение HBeAg и быстрое нарастание титра анти-HBе у больного практически исключает угрозу хронизации ГВ. Отсутствие такой динамики и выявление монотонно низких концентраций анти-НВе, наоборот, может свидетельствовать о развитии хронического ГВ с невысокой активностью (HBeAg-негативный хронический ГВ).
анти-HBs определяют для оценки течения инфекционного процесса и благоприятности его исхода. Факт появления анти-HBs рассматривается как надежный критерий развития постинфекционного иммунитета, т.е. выздоровления после гепатита В. Хотя при хроническом гепатите В HBsAg и анти-HBs могут иногда обнаруживаются одновременно.
Период, в который отсутствуют и HBsAg, и анти-HBs, называется фазой серологического «окна». Сроки появления анти-HBs зависят от особенностей иммунологического статуса больного. Продолжительность фазы «окна» чаще составляет 3–4 мес. с колебаниями до года.
Анти-HBs могут сохраняться пожизненно. Анти-HBs обладают протективными (защитными) свойствами. Этот факт лежит в основе вакцинопрофилактики. В настоящее время в качестве вакцины против ГВ, в основном, применяют препараты рекомбинантного HBsAg. Эффективность иммунизации оценивают по концентрации антител к HBsAg у вакцинированных лиц. Согласно данным ВОЗ, общепринятым критерием успешной вакцинации считается концентрация антител, превышающая 10 мМЕ/мл.
При интегративной фазе развития (т.е. когда вирусные частицы не подвергаются дальнейшей репликации) геном HBV встраивается в геном гепатоцита. Основную роль играет фрагмент, несущий ген, кодирующий HBs антиген Поэтому при этой фазе идет преимущественное образование HBs Ag и антител к коровскому белку и анти- HBe Ag.
Рис. 2. Динамика серологических маркёров при остром гепатите В.
Вирус гепатита B, ДНК (HBV, ПЦР) плазма, кач. в Санкт-Петербурге
Приём и исследование биоматериала
Когда нужно сдавать анализ Вирус гепатита B, ДНК (HBV, ПЦР) плазма, кач.?
Подробное описание исследования
Исследование проводится методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени и позволяет обнаружить ДНК вируса гепатита В. Используется для диагностики гепатита В и контроля эффективности лечения.
Гепатит В (ВГВ) – инфекционное заболевание, преимущественно поражающее печень. Возбудитель — ДНК-содержащий вирус гепатита В (ВГВ, HBV) из семейства Hepadnaviridae. Источник инфекции — больной человек или бессимптомный носитель. Вирус гепатита В стойкий во внешней среде и длительно сохраняется на поверхностях. При комнатной температуре он способен сохранять активность до 3 месяцев, а при отрицательной температуре до 20 лет. Он также не чувствителен к ультрафиолету, формалину, высушиванию и хлорсодержащим дезинфицирующим средствам с низкой концентрацией активного вещества. Зато нагревание до 60С убивает вирус за 4 часа.
В результате заражения вирусом развивается острый или хронический вирусный гепатит. Инкубационный период инфекции — до 12 месяцев. Заболевание протекает циклично.
Преджелтушный период длится 1-16 дней. Симптомы преджелтушного периода:
В желтушный период отмечается изменение цвета склер и слизистых оболочек. Он сопровождается кожным зудом, потемнением мочи, обесцвечиванием кала. При этом печень увеличивается в размерах, изменяются биохимические показатели крови (возрастает концентрация ферментов печени и общего билирубина).
Гепатит считается хроническим, если заболевание продолжается более 6 месяцев. При этом в печени возникают некротические и фиброзные изменения, в результате которых часть клеток погибает, а другая часть замещается соединительной тканью. При этом орган не может полноценно функционировать.
Обследование методом ПЦР позволяет выявить ДНК возбудителя в крови.
Вирус гепатита B, ДНК HBV (колич.) ультрачувствительный
Описание
Вирус гепатита В, ДНК HBV, ультрачувствительный — ультрачувствительное количественное определение ДНК вируса гепатита В в крови, методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с детекцией в режиме «реального времени».
Аналитическая чувствительность: РНК вируса гепатита B — 5 МЕ/мл или 22,5 копий/мл.
Метод ПЦР — позволяет идентифицировать в биологическом материале искомый участок генетического материала и обнаружить единичные молекулы ДНК вируса, не выявляемые другими методами. Принцип метода основан на многократном увеличении числа копий специфичного для данного возбудителя участка ДНК.
С помощью ПЦР-анализа можно диагностировать инфекцию в остром периоде и выявлять случаи носительства.
Аналитическая чувствительность: РНК вируса гепатита B — 5 МЕ/мл или 22,5 копий/мл.
Ультрачувствительные тесты — это тесты с высокой аналитической чувствительностью. Тест позволяет проводить диагностику вируса гепатита B на ранних сроках с момента инфицирования. Исследование помогает выявить инфекцию, даже в тех случаях, когда стандартные методы ПЦР-диагностики бессильны. Исследование оптимально для тестирования донорской крови.
Исследование вируса гепатита B ультрачувствительным методом особенно актуально для пациентов, имеющих субклиническую форму гепатита, а также является достоверным способом оценки эффективности проводимой противовирусной терапии в процессе лечения.
Гепатит В (HBV или ВГВ) — потенциально опасная для жизни инфекция, одно из самых распространенных в мире инфекционных заболеваний печени, вызванное ДНК-содержащим вирусом гепатита В (HBV).
Пути передачи HBV — кровь и или другие жидкости организма инфицированного человека, через слизистые оболочки, повреждения кожного покрова, при незащищённом половом контакте, бытовой путь, использование нестерильных шприцев, переливание крови и пересадка донорских органов, парентеральный путь (от матери к ребёнку). Мать, также, может заразить новорождённого через трещины в сосках.
Длительность инкубационного периода от 4 недель до полугода. Гепатит В может протекать как в лёгкой форме, которая длится несколько недель, так и в виде многолетней хронической инфекции.
Клинические проявления гепатита В
Основные клинические проявления гепатита В: появление слабости, тошнота, снижение аппетита, быстрая утомляемость, лихорадка, желтушность кожных покровов, в лабораторных анализах — нарушения функции печени и специфические антигены вируса гепатита В. Во многих случаях заболевание протекает бессимптомно во время острой стадии инфекции.
Острое заболевание может быстро приводить к летальному исходу, переходить в хроническую инфекцию или заканчиваться полным выздоровлением. После перенесённого ВГВ формируется стойкий иммунитет.
Хронический вирусный гепатит В связан с развитием цирроза и рака печени.
Интерпретация результатов
Единицы измерения: количество ДНК вируса гепатита В, выраженное в МЕ/мл.
Для пересчёта в копии/мл следует применять соотношение 1 МЕ=4,5 копии ДНК гепатита В.
Референсные значения: не обнаружено.
Аналитическая чувствительность 5 МЕ/мл или 22,5 копий/мл.
В диагностике вирусного гепатита В, выявление ДНК вируса в плазме — свидетельствует об инфицировании. В мониторинге эффективности терапии, отсутствие ДНК ВГВ — свидетельствует о достижении вирусологического ответа.
