Cytokeratin 7
Антитело к цитокератину 7 вступает в реакцию с белками, которые обнаруживаются в большинстве эпителиальных клеток протоков, железистом и переходном эпителии мочевыводящих путей и эпителиальных клетках желчных протоков. Это антитело позволяет отличить эпителий лёгкого или молочной железы (положительное окрашивание) от эпителиальных клеток толстой кишки и предстательной железы (отрицательное окрашивание). Антитело к цитокератину 7 также вступает в реакцию со многими доброкачественными и злокачественными поражениями эпителия, такими как аденокарциномы яичника, молочной железы и лёгкого. Карциномы из переходных клеток положительны и рак предстальной железы отрицателен при окрашивании с использованием данных антител. Антитело к цитокератину 7 не взаимодействует с белками промежуточных филаментов.
Цена предоставляется по запросу 
Наши преимущества:
Только качественные
официальные поставки
Минимально возможные
сроки поставок
Доставка по всей России с соблюдением температурного режима
Полный пакет документов
На данный момент мы сотрудничаем с ведущими зарубежными производителями лабораторных реактивов. Нашими клиентами являются как негосударственные, так и государственных учреждения, в том числе медицинские организации Москвы и других городов России. Для постоянных клиентов предусмотрена система скидок.
2003–2021 © ООО «Микротесты в биологии, медицине и ветеринарии». Официальный дистрибьютор ведущих производителей.
+7 (495) 969-98-26
Цитокератины в диагностике опухолевых заболеваний
В новообразованиях человека установлены определенные закономерности экспрессии белков ПФ.
Злокачественные опухоли из эпителия экспрессируют цитокератины, выявляемые и в неизмененных клетках того же гистогенеза. Аденокарциномы в основном экспрессируют цитокератины однослойного эпителия – CK8, CK18, CK19 и часто CK7. В клетках переходноклеточного рака и рака из клеток Меркеля сохраняются биохимические свойства нормальных клеток и выявляется CK20. В анапластических клетках плоскоклеточного рака встречаются CK5, CK6, CK14, CK16 и CK17.
Неэпителиальные опухоли, как правило, цитокератин-негативны, однако некоторые мезенхимальные опухоли, такие как лейомиома, рабдомиосаркома, меланома, шваннома и анапластическая крупно-клеточная лимфома могут экспрессировать цитокератины CK8, CK18, CK19. Эпителиоидная саркома, хондрома и амелобластома экспрессируют цитокератины простого эпителия (CK8, CK18, CK19). Синовиальная саркома и злокачественная мезотелиома экспрессируют цитокератины однослойного эпителия, однако в области расположения дифференцированных клеток возможна экспрессия и высокомолекулярных цитокератинов, характерных для многослойного плоского эпителия.
Цитокератины – важные маркеры для иммуногистохимической классификации недифференцированных опухолей.
Для выявления цитокератинов в опухолевых клетках часто используются так называемые общие цитокератины (клоны AE1/AE3 и MNF 116, Dako) – антитела с широкой специфичностью к различным эпителиям, они могут применяться для дифференциальной диагностики рака с большинством неэпителиальных опухолей. Антитела к общему цитокератину можно использовать для выявления микрометастазов или разбросанных опухолевых клеток в лимфатических узлах и костном мозге, инфильтрирующего роста при раках желудка и молочной железы.
Преимущественная экспрессия цитокератинов многослойного плоского эпителия высокого молекулярного веса, таких как CK5 и CK13, в опухолях характеризует плоскоклеточную дифференцировку и помогает выявитьслабо дифференцированные плоскоклеточные опухоли. CK8, CK18 и CK19 могут экспрессироваться как в аденокарциномах, так и в плоскоклеточных раках, в таких случаях наличие CK5 и отсутствие экспрессии CK7 позволяетпредположить плоскоклеточный рак.
Из внутримозговых опухолей цитокератины экспрессируют: папилломы хориодного сплетения и злокачественные папилломы хориодного сплетения, некоторые менингиомы, в то время как глиомы и низкодифференцированные нейроэктодермальные опухоли CK-негативны.
Антитела к плоскоклеточному эпителию CK5 выявляют базальные эпителиальные и миоэпителиальные клетки и таким образом могут помочь ввыявлении инвазии при раке предстательной и молочной желез.
Для переходноклеточного рака мочевого пузыря экспрессия CK13 и CK20 является хорошим прогностическим признаком. Начало экспрессии CK14 в переходноклеточном раке свидетельствует о плоскоклеточной дифференцировке и неблагоприятном прогнозе. В папиллярных уротелиальных опухолях нормальный (поверхностный) тип экспрессии CK20 характерен для нерецидивирующих опухолей и может быть использован для дифференциальной диагностики между инвазивными и неинвазивными опухолями.
Экспрессия CK7 без коэкспрессии CK20 характерна для аденокарциномы легких, молочной железы, эндометрия и щитовидной железы, а также для немуцинозной аденокарциномы яичников и злокачественной мезотелиомы.
Типичным антигенным паттерном для рака толстого кишечника является экспрессия цитокератинов, характерных для эпителия тонкого кишечника, CK20 и отсутствие экспрессии CK7.
Экспрессия CK7 и CK20 характерна для переходноклеточного рака мочевого пузыря, муцинозного рака яичников и аденокарцином желудка, желчных путей и поджелудочной железы.
В свою очередь, гепатоцеллюлярный рак, рак предстательной железы, почечноклеточный рак и мелкоклеточный рак легких не экспрессируют CK7 и CK20.
На втором этапе удается разделить цитокератин-позитивные низкодифференцированные опухоли на переходноклеточные, плоскоклеточные, нейроэндокринные раки, аденокарциномы и мезотелиому.
Если положительная реакция на цитокератины, характерные для плоского эпителия (CK5, CK13), сочеталась с положительной реакцией на цитокератины однослойного эпителия (CK8, CK18, CK19, CK7), то это – переходноклеточный рак или некоторые протоковые аденокарциномы. Если иммунофенотип опухоли был CK5 и CK14 (+), а CK8, CK18 (-), то это – плоскоклеточный рак.
При положительной реакции на широкий спектр цитокератинов и виментина, это – мезателиома либо синовиальная или эпителиоидная саркома, либо некоторые раки щитовидной железы, почки и другие редкие раки.
В случае коэкспрессии CK8, CK7, CK18 с общим лейкоцитарным антигеном предполагается анапластическая крупноклеточная лимфома, диагноз которой уточняется с помощью антител к CD-30, антигену ALCL.
Если положительная реакция на CK8, CK18, CK19 и CK7 сочеталась с отрицательной реакцией на CK5, CK6, CK14, CK16 и CK17, то эта опухоль являлась аденокарциномой, которая в дальнейшем тестировалась на раковоэмбриональный антиген (РЭА). Выраженная реакция на РЭА свидетельствует о раке толстого кишечника, желудка, поджелудочной железы, желчных протоков.
Слабая реакция на РЭА наблюдается при раке мочевого пузыря, молочной железы, шейки матки, легкого (при плоскоклеточном крупноклеточном варианте). Отрицательная реакция на РЭА наблюдается в клетках аденокарциномы простаты, почки, печени, яичников, щитовидной железы, эндокриноклеточных раковых опухолях.
Третий этап имеет цель определить органную локализацию анапластической опухоли с иммунофенотипом РЭА (+), CK8, CK18, CK19, CK7 (+) и проводится с помощью органоспецифических маркеров.
При раке простаты выявляется специфический антиген простаты (PSA) и щелочная фосфатаза, специфичная для простаты (PAP), при раке щитовидной железы – тиреоглобулин, в клетках печеночноклеточного рака – альфа-фетопротеин, рака яичника – СА-125, хориоэпителиомы – хорионический гонадотропин. Клетки эндокринных раков экспрессируют нейрон-специфическую энолазу (NSE), хромогранин и др. Положительные на виментин и отрицательные на общий цитокератин (CK-Pan) мягкотканые опухоли являются новообразованиями мезенхимальной природы (лимфомы, саркомы), некоторыми нейрогенными опухолями, либо меланомами.
Анапластические опухоли, дающие окраску на виментин подразделяются на лимфомы (Т- и В-клеточные), меланому (положительная реакция с белком S-100), миогенные саркомы (позитивные реакции на гладкомышечный актин, десмин, миоглобин), ангиосаркомы (реагирующие с антителами к фактору VIII свертывания крови, CD31), злокачественную фиброзную гистиоцитому (экспрессирует альфа-1-антитрипсин, CD68, лизоцим, альфа-1-антихимотрипсин, иногда белок S-100), фибросаркому, реагирует с виментином и CD34).
Дата добавления: 2015-07-24 ; просмотров: 12061 ; ЗАКАЗАТЬ НАПИСАНИЕ РАБОТЫ
Значение экспрессии CDX2 и цитокератинов 7 и 20 при дифференцировке колоректальных аденокарциномов из внекишечных желудочно-кишечных аденокарциномов: цитокератин 7- / 20 + фенотип более специфично, чем антитело CDX2
Метастатическая аденокарцинома с неизвестного первичного сайта является общей клинической проблемой. Определение картины опухолей цитокератина (CK) 7 / CK20 является одной из наиболее полезных процедур для этой цели, поскольку картина CK7- / CK20 + типична для колоректальных аденокарцином. CDX2, критический фактор ядерной транскрипции для развития кишечника, выражается в кишечном эпителии и аденокарцином. В настоящем исследовании мы сравнили чувствительность и специфичность экспрессии CDX2 и фенотип CK7- / CK20 + при дифференцировке колоректальных аденокарцином от панкреатической и желудочной аденокарциномы.
Картина окрашивания CK7 / CK20 и экспрессия CDX2 оценивали в 118 случаях колоректального, 59 случаев желудка и 32 случая аденокарциномы поджелудочной железы. Проанализированы чувствительность, специфичность и положительные и отрицательные предсказательные значения фенотипа CK7- / CK20 + и экспрессии CDX2.
Иммунофенотип CK7- / CK20 + был экспрессирован 75 из 118 (64%) колоректальных и 3 из 59 (5%) желудочных опухолей и не наблюдался при любой аденокарциноме поджелудочной железы. Иммунофенотип CK7 + / CK20 + экспрессировали в 24/118 (20%) толстой кишки, 28/59 (48%) желудка и 7/32 (22%) аденокарциномы поджелудочной железы. Экспрессионная картина CK7 + / CK20- наблюдалась только у 2% (2 из 118) колоректальных карцином. CDX2 экспрессировали в 114 из 118 (97%) колоректальных, 36 из 59 (61%) желудка и 5 из 32 (16%) аденокарциномы поджелудочной железы. Не было достоверной связи между экспрессией CDX2 и дифференцировкой опухоли при колоректальной карциноме. При карциномах желудка экспрессия CDX2 была более распространена в опухолях кишечного типа, чем при карциномах диффузного типа. Фенотип CK7- / CK20 + показал специфичность 96,7% при прогнозировании колоректальной аденокарциномы, которая была выше, чем экспрессия CDX2. Экспрессия CDX2 на обоих уровнях отсечения (> 5% и> 50%) имела более высокую чувствительность (96,6% и 78%), чем фенотип CK.
И фенотип CK7- / CK20 +, и экспрессия антитела CDX2 являются высокоспецифичными и чувствительными маркерами колоректального происхождения. Экспрессия CDX2 должна быть полезным дополнением для диагностики аденокарциномы кишечника, особенно когда улучшенные маркеры, такие как CK7 и CK20, дают двусмысленные результаты. Фенотип CK7- / CK20 + превосходит по своей специфичности и положительной прогностической ценности и может быть предпочтительным.
Виртуальный слайд (ы) для этой статьи можно найти здесь:
Метастатическая аденокарцинома с неизвестного первичного сайта является общей клинической проблемой, которая приводит к обширным и дорогостоящим клиническим и радиологическим исследованиям, иногда с обескураживающими результатами [1,2]. Часто бывает важно определить место возникновения метастатической карциномы неизвестного первичного участка, особенно потому, что это может повлиять на выбор лечения. Более точный диагноз приводит к более эффективному лечению, существенно улучшая общий результат [3]. Определение первичного сайта может занять несколько этапов. Клинические особенности, такие как возраст, пол и место метастазов, могут дать первое указание. Гистологическая оценка часто очень полезна, но не может адекватно дифференцироваться между различными первичными опухолями. Иммуногистохимия является наиболее распространенным вспомогательным методом, используемым при анализе пациента с раком неизвестного первичного сайта [4,5].
Цитокератины (CKs) представляют собой эпителиальный класс филаментов среднего размера цитоскелета. Существует 20 подтипов промежуточных нитей цитокератина (CK). Они имеют разную молекулярную массу и демонстрируют дифференциальную экспрессию в различных типах клеток и опухолях [6]. Среди наиболее полезных цитокератинов являются CK7 и CK20 [7]. CK7 встречается во многих протоковых и железистых эпителиях, включая легкие, молочную железу, яичник и эндометрий [8,9]. CK20 экспрессируется в желудочно-кишечном (GI) эпителии, уротелии и клетках Меркель [10]. Комбинированные картины экспрессии CK7 и CK20 широко изучались при различных первичных и метастатических карциномах [5,7,11-17]. CK20 экспрессируется отдельно в большинстве аденокарциномы кишечника и в клеточных карциномах Меркель, тогда как CK7 присутствует без CK20 в большинстве аденокарциномы молочной железы, легких и яичников и CK20 при уротелиальной, панкреатической и желудочной карциномах. Известно, что картина экспрессии CK7- / CK20 + очень характерна для колоректальных карцином [11,12,17-19], однако не все колоректальные карциномы показывают картину экспрессии CK7- / CK20 +. Иногда колоректальные карциномы могут проявлять значительную экспрессию CK7, и наоборот, экспрессия CK20 может наблюдаться во множестве неколоктетальных аденокарцином, таких как карциномы уротелиального, желудочного и панкреатобиарного тракта 20. По этой причине сохраняется интерес к разработке новых и более специфических маркеров дифференцировки кишечника, и CDX2, по-видимому, является таким маркером.
CDX2 представляет собой ген гонобокса каудального типа, кодирующий фактор транскрипции, который играет важную роль в пролиферации и дифференцировке клеток эпителия кишечника [25]. Белок (CDX2) обычно экспрессируется во всей эмбриональной и постнатальной жизни в ядрах эпителиальных клеток кишечника из проксимальной двенадцатиперстной кишки в дистальную прямую кишку [26,27]. Предыдущие исследования показали, что CDX2 экспрессируется в нормальных и неопластических эпителиальных клетках кишечника с относительно высокой чувствительностью и специфичностью и что он может быть использован в качестве иммуногистохимического маркера для новообразований кишечного происхождения 30. Однако экспрессия CDX2 также обнаруживалась при карциноме желудка и других карциномах с морфологией кишечного типа 36.
В настоящем исследовании мы изучили профили экспрессии иммуногистохимических маркеров CK7, CK20 и CDX2 в первичных колоректальных, желудочных и панкреатических аденокарциномах с учетом потенциальной применимости этих маркеров в клиническом контексте метастатических аденокарцином. Мы также оценивали чувствительность, специфичность, положительную прогностическую ценность и отрицательную прогностическую ценность экспрессии CDX2 и иммунофенотипа CK7- / CK20 + для дифференцировки колоректальных аденокарцином от аденокарциномы поджелудочной железы и желудка.
Отделения толщиной 4 мкм были вырезаны из блоков внедренной в парафин ткани, депарафинизированы и регидратированы, как обычно. Чтобы уменьшить неспецифическое окрашивание фона из-за эндогенной пероксидазы, слайды инкубировали в перекиси водорода в течение 15 мин. Перед иммуноокрашиванием поиск антигена проводили путем инкубации слайдов в течение 15 мин с пепсином (LabVision, № каталога AP-9007) с концентрацией 1 мг / мл для CK20. Слайды
были микроволновыми в 10 мМ лимонной кислоты при рН 6,0 в течение 20 мин для CK7 и CDX2. Слайды инкубировали в течение 60 мин с первичными антителами к CK7 (клон OV-TL 12/30, LabVision / NeoMarkers, 1:50), CK20 (клон Ks20.8, Dako, 1:50) и CDX2 (клон AMT 28, NovoCastra, 1:50) при комнатной температуре. Стандартную методику авидин-биотин-пероксидазный комплекс (ABC) проводили с использованием набора вторичной диагностики LabVision (UltraVision Detection System Anti-polyvalent, HRP). AEC использовали в качестве хромогена. Все слайды контрастировали с гематоксилином Майера.
χ2 и точные тесты Фишера были использованы для сравнения различий в процентах от положительных результатов между группами. Для всех статистических анализов использовался SPSS 13.0 для Windows. Учитывались чувствительность, специфичность и положительные и отрицательные предсказательные значения фенотипа CK7- / CK20 + и экспрессии CDX2.
В таблицах 1 и 2 показан процент случаев, окрашенных CDX2, CK7 и CK20 в колоректальных аденокарциномах, аденокарциномах желудка и аденокарциномах поджелудочной железы.
Распределение окрашивания CK7, CK20 и CDX2 с процентами положительных клеток в первичных колоректальных, аденокарциномах желудка и поджелудочной железы
Фенотип CK7 / 20 и экспрессия CDX2 в наших изученных группах
Экспрессия CK7 была обнаружена у 22% (26/118) колоректального отдела, у 80% (47/59) желудка и у 97% (31/32) аденокарциномы поджелудочной железы. Реактивность CK20 была обнаружена у 84% (99/118) колоректального участка, у 53% (31/59) желудка и у 22% (7/32) аденокарциномы поджелудочной железы. Иммунофенотип CK7- / CK20 + экспрессировали 75 из 118 (64%) колоректальных и 3 из 59 (5%) опухолей желудка и не наблюдался при любой аденокарциноме поджелудочной железы (χ2 = 79,992, p 5% и> 50%) имела более высокую чувствительность (96,6% и 78%) и более высокую отрицательную прогностическую ценность (92,6% и 74,8%) по сравнению с фенотипом СК. Специфичность экспрессии CDX2 не достигла уровня специфичности фенотипа CK7 / CK20 на уровне> 50% (84,6%).
Чувствительность, специфичность и положительные / отрицательные предсказательные значения экспрессии CDX2 и иммунофенотипа CK7- / CK20 + при дифференцировке колоректальных аденокарцином от аденокарциномы поджелудочной железы и желудка.
PPV: положительное значение прогнозирующего значения NPV: отрицательная прогнозируемая стоимость
Диагноз метастатической карциномы неизвестного происхождения может быть очень сложным. Определение первичного участка метастаза является проблемой как для онкологов, так и для патологоанатомов, имеющих потенциально важные клинические и терапевтические последствия 2. При установлении карциномы неизвестного первичного, клинопатологическая корреляция и панель стандартных иммуноостров помогают определить первичный сайт и провести соответствующее лечение [4,5].
Цитокератины представляют собой группу из примерно 20 белков, которые состоят из типа промежуточной нити и дифференциально экспрессируются в эпителии различных участков. Наиболее часто используемыми цитокератинами являются CK7 и CK20 9. CK7 встречается в железистом эпителии и эпителиальных опухолях легких, яичника, эндометрия и молочной железы, но не встречается в эпителии GI. Напротив, CK20 выражается главным образом в нормальных железах и эпителиальных опухолях желудочно-кишечного тракта, уротелия и клеток Меркель. Профиль цитокератина 7/20 конкретной опухоли оказался полезным помощником в дифференциальной диагностике карцином, поскольку первичные и метастатические опухоли имеют тенденцию удерживать профили цитокератина эпителия, из которого они возникают [13]. В своей обзорной статье Tot суммировал результаты 29 исследований, содержащих более 3500 зарегистрированных случаев аденокарциномы, окрашенных CK20 и CK7. В этом обзоре было указано, что метастатические колоректальные, желудочные и поджелудочные аденокарциномы имеют сходные соотношения окраски CK7 и CK20 в качестве их первичных опухолей. Только желудочные аденокарциномы показали статистически значимые различия в экспрессии CK20 при сравнении первичных и метастатических мест [13].
CDX2 представляет собой последнюю из серии факторов транскрипции, которые нашли важные применения в диагностической хирургической патологии как высокоспецифичные и чувствительные маркеры конкретных типов клеток и опухолей. Факторы ядерной транскрипции имеют несколько отличительных преимуществ по сравнению с цитоплазматическими маркерами «дифференцировки»: (1) факторы транскрипции обычно дают сигнал «все или ни одного», причем большинство положительных случаев, содержащих положительный сигнал в> 90% опухолевой клетки Население; (2), учитывая ядерную локализацию сигнала, его гораздо реже путают с биотином или другими источниками ложноположительных цитоплазматических сигналов; и (3) отсутствие связи между уровнями экспрессии ядерных транскрипционных факторов и состоянием дифференциации опухоли [28]. Например, в описанном здесь исследовании 114 из 118 случаев аденокарциномы толстой кишки были CDX2-положительными, независимо от степени опухоли.
И фенотип CK7- / CK20 +, и экспрессия антитела CDX2 являются высокоспецифичными и чувствительными маркерами колоректального происхождения. Экспрессия CDX2 должна быть полезным дополнением для диагностики аденокарциномы кишечника, особенно с профилями CK7 + / CK20 + или CK7- / CK20. Иммунофенотип CK7- / CK20 + более специфичен для дифференцировки колоректальных аденокарцином от панкреатической и желудочной аденокарциномы, чем экспрессия CDX2. Фенотип CK7- / CK20 + превосходит по своей специфичности и положительной прогностической ценности и может быть предпочтительным.
Авторы заявляют, что у них нет конкурирующих интересов.
РБ осуществил сбор данных, патологическую и иммуногистохимическую оценку и интерпретацию, составление и составление окончательной рукописи; SY и HH участвовали в патологической и иммуногистохимической оценке и интерпретации. Все авторы прочитали и утвердили окончательную рукопись.
Cytokeratin 7 clone rn7 что
Экспертное заключение – доктор медицинских наук, профессор кафедры патологической анатомии лечебного факультета РГМУ М.В. Самойлов
Учебное пособие выполнено в рамках инновационной образовательной программы Российского университета дружбы народов, направление «Комплекс экспортоориентированных инновационных образовательных программ по приоритетным направлениям науки и технологий»
ПРИКЛАДНЫЕ ВОПРОСЫ ИММУНОГИСТОХИМИИ Тема № 4. Значение клеточных белков в оценке гистогенеза опухолей Тема № 5. Рецепторные белки в неизмененных и опухолевых клетках Тема № 6. Белки – маркеры клеточного цикла Тема № 7. Факторы апоптоза и пролиферации
ПРАКТИЧЕСКИЕ ВОПРОСЫ ОНКОМОРФОЛОГИИ
В настоящее время иммуногистохимический метод исследования широко применяется для выявления неизвестной локализации первичной опухоли при наличии её метастазов. От 10 до 15% раковых опухолей характеризуются метастазами в различных органах, полостях и лимфатических узлах.
При морфологической диагностике метастатические опухоли, согласно рекомендациям Европейского общества медицинской онкологии (ESMO, 2004), целесообразно разделять на пять крупных категорий: аденокарцинома, плоскоклеточный рак, нейроэндокринный рак, недифференцированный рак, недифференцированная опухоль. Эти морфологические категории наряду с данными о распространённости процесса во многих случаях позволяют определить адекватный план обследования и лечения.
Частота случаев, когда заболевание сопровождалось развитием метастазов, а локализация первичной опухоли на момент морфологического исследования неизвестна, составляет 3-15% от всех онкологических заболеваний. При этом локализация первичного очага определяется при жизни в среднем у 30-40% пациентов, на аутопсии – у 60-70%.
Иммуногистохимическое исследование в зависимости от морфологического типа новообразования позволяет уточнить гистогенез опухоли и/или высказаться о вероятной локализации первичного очага. Большинство из этих опухолей представляют аденокарциномы молочной железы, толстого кишечника, легких, яичников, поджелудочной железы, предстательной железы и желудка.
В случае метастазов аденокарциномы задача иммуногистохимического исследования состоит в выявлении вероятного источника метастазирования.
Для этих целей в настоящее время используется целый ряд маркеров включая цитокератины 7 и 20, тиреоидный фактор транскрипции (TTF-1), CA125, CDX2, рецепторы к эстрогенам, GCDFP-15, лизоцим, мезотелин, простат-специфический антиген.
Цитокератин 7 (CK7) относится к семейству белков промежуточных филаментов, имеет молекулярную массу 54 кДа, выявляется в различных видах железистого эпителия. Антитела клона OV-TL (Dako) окрашивают цитоплазму различных видов клеток нормального и неопластического железистого эпителия, включая эпителий протоков. CK7 выявляется в клетках цилиндрического и железистого эпителия легких, шейки матки, молочной железы, желчевыводящих путей и собирательных трубочек почек. CK7 окрашивает переходный эпителий мочевого пузыря, эпителий яичников и легких. Иногда можно встретить положительное окрашивание эндотелия сосудов. В свою очередь, CK7 не экспрессируется в эпителиальных клетках желудочно-кишечного тракта, предстательной железы. Практически не выявляется CK7 в гепатоцитах, эпителии проксимальных и дистальных извитых канальцев почек, миоэпителиальных клетках, многослойном эпителии кожи, языка, пищевода и эктоцервикса. Моноклональные антитела OV-TL выявляют отдельные виды аденокарцином и могут быть использованы для проведения дифференциальной диагностики между CK7-позитивными тканями (такими как рак яичников и переходноклеточный рак) и CK7-негативными тканями (такими как аденокарциномы желудочно-кишечного тракта и рак предстательной железы).
Цитокератин 20 (CK20) является представителем кератина I типа, который непосредственно экспрессируется в эпителии желудка и тонкого кишечника, уротелии и клетках Меркеля кожи. Антитела (клон Ks 20.8, Dako) реагируют с соответствующим белком молекулярной массой 46 кДа. CK 20 – это основной белок зрелых энтероцитов и бокаловидных клеток; он специфически экспрессируется в эпителиальных клетках слизистой оболочки желудка и тонкого кишечника. Его также можно выявить в аденокарциномах толстого кишечника, желудка, поджелудочной железы, желчных капилляров, в муцинозных опухолях яичников, переходноклеточном раке мочевого пузыря и раке из клеток Меркеля. В свою очередь, в плоскоклеточных раках, аденокарциномах молочной железы, легких, эндометрия, не муцинозных опухолях яичников и мелкоклеточных карциномах легких CK 20 не экспрессируется.
Лизоцим катализирует гидролиз отдельных мукополисахаридов клеточной оболочки бактерий. Используется для выявления опухолей из гистиоцитов и лейкозных клеток миелоидного ряда. Он выявлен в клетках селезенки, легких, почек, лейкоцитах крови, плазматических клетках, слюне, молоке и слезной жидкости.
Мезотелин – клеточный гликопротеин (молекулярная масса 40 кДа), располагается на поверхности мезотелиальных клеток и связан с механизмами клеточной адгезии. Он также выявляется в мезотелиомах, эпителиальных раках яичников и некоторых плоскоклеточных раках. Клон 5В2 (Novocastra) окрашивает эпителиоидные мезотелиомы и аденокарциномы легких, яичников, опухоли брюшины, эндометрия, поджелудочной железы, желудка и толстого кишечника. Антитела не реагируют с тканью почек, печени, плаценты, кожи и щитовидной железы. Мезотелина много в обычных мезотелиальных клетках, из которых формируются злокачественные мезотелиомы и цистаденокарциномы яичников. Эти антитела вместе с антителами к калретинину могут быть использованы для выявления мезотелиом.
CDX2 – рекомбинантный белок прокариотов, соответствующий аминокислотному N-терминальному участку молекулы CDX2 человека. Является специфическим транскрипционным фактором клеток тонкого кишечника. Ген cdx2 кодирует интестинально-специфический транскрипционный фактор, его белок экспрессируется на ранних стадиях развития тонкого кишечника и может иметь значение в регулировании пролиферации и дифференцировки эпителиальных клеток тонкого кишечника. Играет важную роль в инициации дифференцировки клеток в зрелые энтероциты. Клон AMT28 (Novocastra) реагирует с 40кДа белком, расположенным в ядрах клеток. Он экспрессируется в ядрах эпителиальных клеток кишечника от двенадцатиперстной кишки до прямой кишки. Белок CDX2 экспрессируется также в первичных и метастатических опухолях толстого кишечника, а также выявляется при кишечной метаплазии желудка и кишечном типе рака желудка, в свою очередь, в нормальных эпителиальных клетках желудка он не встречается. Данный белок обнаруживается в ядрах только цилиндрического эпителия и раковых клетках колоректальных аденокарцином, таким образом с его помощью можно идентифицировать метастазы рака толстого кишечника.
CA125 – белок ракового антигена яичников. Моноклональные антитела (клон Ov185:1, Novocastra) распознают муциноподобный гликопротеин молекулярной массой около 200 кДа. Антитела окрашивают различные опухоли, такие как аденокарциномы толстого кишечника, аденокарциномы молочной железы, опухоли матки, бронхо-альвеолярные раки, эндометриоидные и серозные аденокарциномы яичников.
ER – рецепторы к эстрогенам. Клон 6F11 (Novocastra) взаимодействует с эстрогеновым рецептором альфа. Антитела окрашивают ядра с рецепторами к эстрогенам в эпителиальных и гладкомышечных клетках матки, а также ядра эпителия молочных желез. Выявление рецепторов к стероидным гормонам широко применяется при лечении гормонально-зависимых опухолей. Наличие рецепторов к эстрогенам является маркером рака молочной железы, а также может свидетельствовать о прогнозе заболевания и эффективности эндокринной терапии.
Простат-специфический антиген (ПСА) – представляет собой гликопротеин. Клон ER-PR8 (Dako) получен к белку молекулярной массой 35 кДа. ПСА биохимически и иммуногистохимически отличается от другого широко используемого маркера опухоли предстательной железы – кислой простатической фосфатазы. Он располагается в цитоплазме клеток ацинарного и протокового эпителия нормальной ткани, выявляется при доброкачественной гиперплазии предстательной железы и аденокарциноме. Эти антитела можно использовать для выявления метастазов рака предстательной железы, поскольку ПСА выделяется опухолевыми клетками простаты и определяется в плазме крови у больных с раком простаты.
GCDFP-15 – белок, который встречается при диффузной кистозной мастопатии, для которой характерны макро- и микрокисты, протоковая и дольковая гиперплазия и др. патология молочных желез. Кисты формируются за счет апокриновой секреции эпителиальными клетками. Жидкость кист содержит гликопротеины, включая уникальный 15 кДа мономер. В нормальной ткани подобный белок встречается в эпителии слезных, подъязычных и мелких слюнных желез, в клетках серозных оболочек, трахеальных и бронхиальных желез.
GCDFP-15 и PSA одновременно экспрессируются в опухолях молочных желез с положительной реакцией на рецепторы к андрогенам. Данный маркер может быть использован для выявления аденокарциномы молочной железы, протоковых раков слюнных желез и апокринового эпителия.
Часть маркеров, такие как ПСА для рака предстательной железы, TTF-1 для рака легких, работают моноспецифично. Другая часть маркеров этой панели характерна для нескольких опухолей: так, рецепторы к эстрогенам могут быть выявлены при раке молочной железы или яичников, CDX2 – при опухолях желудочно-кишечного тракта. Часть маркеров может характеризовать источник метастаза только комплексно: рецепторы к эстрогенам, мезотелин и CA125 характеризуют опухоли яичников.
Метастазы плоскоклеточного и нейроэндокринного рака без выявленного
первичного очага (Савелов Н.А., Петровичев Н.Н., 2006)
При метастазах плоскоклеточного рака проводить иммуногистохимическое исследование нецелесообразно, так как возможности метода не позволяют уточнить вероятный источник метастазирования. Это относится и к метастазам низкодифференцированного нейроэндокринного рака. Однако при метастазах высокодифференцированного нейроэндокринного рака (синоним – атипичный карциноид) коэкспрессия CK7 и TTF1 может свидетельствовать о локализации первичного очага в легком, а коэкспрессия CK20 и CDX2 – в органах ЖКТ.
Метастазы недифференцированного рака без выявленного первичного
очага (Савелов Н.А., Петровичев Н.Н., 2006)
У пациентов с метастазами без четких морфологических признаков железистой (аденогенной), нейроэндокринной или плоскоклеточной дифференцировки главной задачей дополнительных методов исследования является уточнение гистогенеза опухоли (точнее, установление направления дифференцировки опухолевых клеток). Для этого применяется следующая панель антител: р63, CК5, CK14 или CК5/CK6, CК18, СD56 (N-CAM).
Антитела к белку Р63 (клон 4А4, Dako). Белок Р63 принадлежит к семейству Р53 опухолевых супрессорных генов, которые также включают белок Р73. Эти белки регулируют процессы клеточной транскрипции и запускают процессы апоптоза в ответ на повреждение ДНК и развитие гипоксии. Р63 экспрессируется в ядрах базальных клеток различных видов эпителия. Белок Р63 выявляется в пролиферирующих клетках эпителия шейки матки, уротелия и предстательной железы. Он также экспрессируется в большинстве низкодифференцированных плоскоклеточных раков. Антитела к Р63 помогают дифференцировать доброкачественные и злокачественные опухоли предстательной железы.
Антитела к белку CD56 (клон МОС-1, Dako). Белок CD56 является антигеном клеток натуральных киллеров. Реагирует с CD4+ и CD8+, Т-клетками в периферической крови. CD56 можно выявить в нейробластоме и мелкоклеточном раке легких, а также некоторых других опухолях.
Цитокератины CK5/CK6 (клон D6/16 B4, Dako). Цитокератины относятся к семейству промежуточных филаментов и выявлены практически во всех клетках. Типы цитокератинов CK5/CK6 выявляются в мезотелиальных клетках и не встречаются в аденокарциномах. CK5/CK6 применяются как маркеры мезотелиомы и плоскоклеточного рака легких, болезни Боуэна (разновидности карциномы, поражающей чешуйчатые клетки эпидермиса кожи, но не распространяющейся на ее базальные слои). Они не встречаются в аденокарциномах легких, но окрашивают мезотелиому и базальные клетки желез простаты. Данные антитела не реагируют с тканями мезодермального происхождения, такими как мышцы и соединительная ткань. Цитокератины CK5/CK6 экспрессируются в низкодифференцированных аденокарциномах и выявляются в эпителиоидных мезотелиомах.
Цитокератин CK14 (клон LL002, BioGenex), молекулярная масса 50 кДа, – это кислый цитокератин первого типа, с помощью которого можно отличить многослойный плоский эпителий от простого эпителия. Цитокератин CK14 равномерно экспрессируется в цитоплазме всех клеток многослойного плоского ороговевающего эпителия. Моноклональные антитела к цитокератину CK14 помогают дифференцировать типы клеток в молочных железах при развитии аденокарциномы.
Цитокератин CK18 (клон DC10, Dako) – белок с молекулярной массой 45 кДа. Антитела реагируют с большинством видов простого эпителия, включая эпителий протоков и ацинусов желез. Данный белок экспрессируется в эпителии щитовидной железы, молочной железы, желудочно-кишечного тракта и дыхательной системы. Антитела используют для выявления аденокарцином легких, при этом они окрашивают цитоплазму опухолевых клеток из эпителия и не окрашивают опухолевые неэпителиальные клетки (глиомы, меланомы, остеосаркомы).
