Cd138 маркер что это
Комплексное гистологическое и иммуногистохимическое исследование с определением хронического эндометрита (фаза пролиферации) – комплекс лабораторных исследований биоптата слизистой оболочки матки, включающий морфологическое исследование с использованием стандартных методик окраски, а также определение наличия в эндометрии маркеров иммунокомпетентных клеток, присутствие которых свидетельствует о хроническом воспалительном процессе.
Гистологическая и ИГХ диагностика хронического эндометрита (фаза пролиферации (CD20/CD138/CD56/HLA-DR)).
Сhronic endometritis Histology & Immunohistochemistry (CD20, CD138, CD56, HLA-DR).
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Образец ткани (биоптат) из полости матки.
Как правильно подготовиться к исследованию?
Общая информация об исследовании
Эндометрий – это внутренняя часть слизистой оболочки матки, обращенная к ее полости. Его основная функция состоит в создании оптимальных условий для имплантации эмбриона в матку и успешного наступления беременности. Ведущее значение в процессе имплантации имеет рецептивность эндометрия – способность воспринимать оплодотворенную яйцеклетку и обеспечивать ее прикрепление и внедрение в полость матки. На рецептивность оказывают влияние структурные изменения эндометрия, происходящие циклически, соответственно стадиям менструального цикла, и синхронизированные посредством гормональной регуляции с процессами созревания яйцеклетки. Структурная перестройка эндометрия контролируется стероидными гормонами яичников – эстрогеном и прогестероном, влияние которых опосредуется через соответствующие рецепторы, располагающиеся внутри клеток эндометрия. Достаточный уровень рецепторов каждого гормона необходим для подготовки эндометрия к имплантации эмбриона.
Нарушение рецептивности эндометрия, а также его взаимодействия с оплодотворенной яйцеклеткой являются причиной бесплодия, невынашивания беременности и неудач вспомогательных репродуктивных технологий, в том числе экстракорпорального оплодотворения, при котором, по некоторым данным, около 65% неудачных попыток связаны именно с патологией эндометрия. Значительная роль в генезе эндометриальной дисфункции, сопровождающейся нарушением рецептивности эндометрия, принадлежит хроническому эндометриту. Длительное течение воспалительного процесса в слизистой оболочке тела матки приводит к структурным нарушениям эндометрия и снижению или практически полному отсутствию на его клетках эстрогеновых и прогестероновых рецепторов. Однако при адекватном лечении возможно восстановление физиологического состояния эндометрия и успешное наступление беременности. В связи с этим диагностика хронического эндометрита занимает важное место в определении причин бесплодия и неудачных попыток вспомогательных репродуктивных технологий.
На первом этапе исследования биоптата в обязательном порядке проводится гистологическое исследование, которое позволяет оценить состояние клеточных структур, желез и сосудов эндометрия, а также наличие признаков воспалительных изменений. Морфологическим субстратом хронического эндометрита являются лимфоидные инфильтраты в слое эндометрия, состоящие из лимфоцитов и плазматических клеток. В последнее время в связи с широким применением противомикробной и противовоспалительной терапии классические гистологические признаки хронического эндометрита выявляются все реже, что требует проведения дополнительных методов диагностики. В состав данного комплекса входит иммуногистохимическое исследование, которое включает в себя определение в эндометрии маркеров иммунокомпетентных клеток, степень присутствия которых коррелирует с наличием и активностью воспалительного процесса:
Биологический материал для данного исследования целесообразно получать посредством пайпель-биопсии эндометрия или соскоба из полости матки. После взятия биоптата его помещают в ёмкость с фиксирующим раствором на 24-48 часов. По окончании фиксации биоптат декальцинируют, обезвоживают и пропитывают парафином – получаются готовые парафиновые блоки. Для гистологического исследования из парафинового блока с помощью специального микроножа нарезают тончайшие срезы, которые затем прикрепляют к предметным стеклам и красят рутинными красителями. Затем для проведения иммуногистохимического исследования срезы окрашивают растворами антител, меченных флюоресцирующими метками, специфичными к одному из исследуемых маркеров. Если в клетках эндометрия присутствует искомый рецептор, антитела связываются с ним и при просмотре стекла под специальным микроскопом можно увидеть флюоресценцию, что будет свидетельствовать о положительном результате теста. Количество применяемых растворов с антителами соответствует количеству маркеров, которые исследуются в образце. Степень флюоресценции и процент клеток, в которых она есть, лежат в основе интерпретации результатов иммуногистохимического анализа.
Для чего используется исследование?
Когда назначается исследование?
Что означают результаты?
Результат гистологического исследования включает в себя макроскопическое описание биоптата (размеры, цвет), описание желез, стромального и сосудистого компонента эндометрия с наличием или отсутствием признаков воспалительных изменений.
Степень выраженности хронического эндометрита по маркерам иммунокомпетентных клеток оценивают по количеству позитивных клеток в поле зрения:
для CD138: 0 клеток – норма, единичные клетки – слабо выраженный, 2-3 – умеренно выраженный, более 5 – выраженный;
для CD56: до 10 клеток – норма, повышены в два раза – слабо выраженный, повышены в три раза – умеренно выраженный, повышены более чем в 4-5 раз – выраженный;
для CD20: до 3 клеток – норма, повышены в два раза – слабо выраженный, повышены в три раза – умеренно выраженный, повышены более чем в 4-5 раз – выраженный.
Маркер HLA-DR: норма – до 10 в поле зрения, повышение характерно, в том числе, для обострения хронического эндометрита.
Результат исследования обязательно содержит интерпретацию полученных данных врачом-патоморфологом.
Что может влиять на результат?
Качество предоставленных парафиновых блоков, опыт и квалификация врача-патоморфолога, так как иммуногистохимический метод не в полной мере стандартизирован и оценка его результатов в некоторой степени субъективна.
Кто назначает исследование?
Хронический эндометрит
Естественная защита матки от инфекции
Как уже было сказано, матка хорошо защищена от попадания инфекции. Защита эта многоуровневая и состоит из следующих элементов:
Причины развития хронического эндометрита
Эндометрит – воспалительный процесс, который вызван тем, что в слизистую оболочку матки попал некий патоген (бактериальный или вирусный). Это могут быть условно-патогенные микроорганизмы влагалища, например, Streptococcus spp., Escherichia coli, Enterococcus faecalis, Klebsiella pneumoniae, Staphylococcus spp., Corynebacterium и Mycoplasma/Ureaplasma spp. или изначально патогенные микроорганизмы, такие как Chlamydia trachomatis и Neisseria gonorrhoeae. Инфекция активирует клетки иммунной системы, которые и находят в эндометрии матки при диагностировании хронического эндометрита.
Иммунные клетки матки в норме и при патологии
На поверхности иммунных клеток находятся различные специфические молекулы, которые позволяют их классифицировать. Эти молекулы обозначаются аббревиатурами, которые начинаются с английских букв CD (claster of determination). Дальше идет число. В зависимости от того, какие молекулы присутствуют на поверхности иммунной клетки, ее можно отнести к той или иной субпопуляции, например, лимфоцитов, или же к тому или иному функциональному состоянию.
При возникновении воспалительного процесса в матке обнаруживаются плазматические клетки, то есть высоко специализированные лимфоциты, которые являются конечной точкой развития В-лимфоцитов. Эти клетки синтезируют антитела. Маркером активности плазматических клеток, который не обнаруживается на других клетках в значимых количествах, является синдекан-1. Эта молекула относится к классу так называемых протеогликанов группы трансмембранного гепаринсульфата. По международной номенклатуре синдекан-1 обозначается кодом CD138.
Таким образом, простого обнаружения клеток иммунной системы в слизистой оболочке матки без типирования совершенно недостаточно для постановки диагноза хронический эндометрит. Такой подход привел в свое время (в начале 2000-х) к гипердиагностике этого заболевания, что, в свою очередь, приводило к ненужному лечению, ослабляя организм и задерживая момент наступления беременности.
Антигенпрезентирующими являются 3 вида клеток: В-лимфоциты, макрофаги и дендритные клетки. HLA-DR-положительные клетки присутствуют в норме в эндометрии и передают информацию иммунной системе, необходимую для образования клонов Т-регуляторных клеток, которые формируют иммунологическую толерантность к будущему эмбриону. Поэтому концентрация HLA-DR клеток зависит от частоты половых контактов женщины, общего количества спермы, поступающей во влагалище, времени последнего полового акта, особенностей иммунной системы и других факторов.
Особенно же специалисты нашей клиники предостерегают о диагнозе аутоиммунный эндометрит. Чаще всего при постановке такого диагноза врач-гистолог не располагает данными о наличии аутоиммунных маркеров или специфических антител. Мы считаем, что данных для подтверждения достоверности такого диагноза в клинической практике недостаточно.
Анализ нескольких факторов при постановке диагноза
Диагноз хронический эндометрит ставит врач-клиницист, а не врач-гистолог. При этом он должен учитывать несколько факторов.
Да, данные, полученные при биопсии эндометрия, очень важны, в частности, о наличии CD138 и CD56 клеток. Однако этого недостаточно. По результатам исследований, не менее, чем в 5% случаев у абсолютно здоровых женщин с нормальной фертильностью и без каких-либо признаков воспалительного процесса имеется наличие маркера CD138.
Поэтому при постановке диагноза учитываются все данные анамнеза:
Помочь в постановке диагноза также может гистероскопия. При осмотре эндометрия обращают внимания на признаки воспаления, такие как гиперемия (чрезмерное снабжение кровью сосудов матки), белые пятна на фоне гиперемии (картина похожа на поверхность клубники), отек и микрополипы.
Все большую роль приобретает идентификация изначального патогенного микроорганизма. Микробиологическое исследование может не только помочь в диагностике, но и в выборе лечения.
Трансвагинальное УЗИ при постановке диагноза не считается специфичным. Обычно УЗИ участвует в диагностике хронического эндометрита только при наличии кист. Однако заподозрить это заболевание можно и по другим признакам, таким как локальные дефекты эндометрия, неравномерность толщины базального слоя эндометрия, его зазубренность или изрезанность, утолщение стенок матки или увеличение ее размеров и т.д. Признаки эндометрита, видимые на УЗИ, различаются в зависимости от вида и тяжести заболевания. Однако, как и говорилось раньше, однозначно поставить диагноз благодаря одному только УЗИ нельзя.
Эпидемиология
Из-за маленьких выборок и использования разных методов диагностики в различных исследованиях, ученые не могут прийти к единому мнению, насколько же распространен хронический эндометрит. Обычно приводят цифры от 8% до 72% для женщин репродуктивного возраста.
Влияние на здоровье женщины и репродуктивную функцию
Существует много исследований на тему связи хронического эндометрита и бесплодия. К сожалению, у этих работ существует та же проблема, что и при изучении эпидемиологии, поэтому разброс значений очень велик. Приводят данные, что 2.8-56.8% женщин с бесплодием, 14-67.5% женщин с рецидивирующей неудачей имплантации и 9.3-67.6% женщин с привычным невынашиванием страдают от хронического эндометрита. Большинство специалистов согласны, что это состояние нельзя игнорировать при поисках причины бесплодия.
Даже если на данный момент не ставится цель забеременеть, хронический эндометрит все равно нужно пролечить. Часто это заболевание сопровождается болью в области таза при менструации или во время полового акта, что ухудшает качество жизни. Могут появиться функциональные проблемы с кишечником или хроническая усталость. Хронические воспалительные процессы вредны для организма в целом. Пожалуйста, не игнорируйте поставленный диагноз или свои подозрения о наличии у вас хронического эндометрита. Наша клиника всегда готова предоставить вам помощь.
Лечение
Так как эндометрит обычно имеет бактериальную или вирусную этиологию, в первую очередь нужно убрать первопричину.
После подтверждения диагноза проводится курс антибактериальной и противовоспалительной терапии.
Согласно нашему клиническому опыту, эта терапия (обычно один курс антибиотиков) позволяет более чем в 70% случаев убрать активность воспалительного процесса. Если первый курс не сработал, то, как правило, у подавляющего большинства женщин срабатывает второй курс.
Хронический эндометрит – заболевание, которое зачастую сложно диагностировать. Но при правильной терапии до наступления беременности оно хорошо лечится и в будущем не препятствует наступлению беременности и рождению здорового ребенка.
Иммуногистохимическое исследование хронического эндометрита с типированием плазматических клеток (CD138)
Описание
Иммуногистохимическое исследование хронического эндометрита с типированием плазматических клеток (CD-138) — исследование биоптата ткани, меченого антителами, под микроскопом. Анализ выполняется для проведения дифференциальной диагностики хронического эндометрита.
ИГХ-исследования проводят после выполнения гистологического исследования.
Иммуногистохимическое исследование
Вид морфологического исследования тканей, полученных в ходе биопсии, и меченых специфическими антителами. В основе метода лежит принцип взаимодействия «антиген-антитело». Ткань, в которой происходит патологический процесс, экспрессирует антигены. При нанесении на образец ткани антител, образуется комплекс антиген-антитело. Благодаря меткам, он становится доступным для визуализации. Врач-патоморфолог изучает количество клеток, окрашенных маркёром. Он определяет в исследуемой ткани локализацию клеток, гормонов и их рецепторов, ферментов, иммуноглобулинов, компонентов клеток и отдельных генов.
Хронический эндометрит
Хронический эндометрит — это клинико-морфологический синдром, при котором возникают функциональные и структурные изменения слизистой полости матки вследствие повреждения клеток эндометрия инфекционным агентом. Хронический эндометрит может протекать без отсутствия клинических признаков. Он часто является причиной нарушения репродуктивной функции, вплоть до бесплодия.
По этиологическому фактору хронический эндометрит бывает специфическим (с выявлением инфекции) или неспецифическим (полимикробной ассоциации).
«Золотой стандарт» в диагностике хронического эндометрита это гистологическое исследование.
Диагноз выставляется врачом-патоморфологом на основании изучения биоптатов эндометрия. Морфологически заболевание проявляется инфильтрацией стромы эндометрия плазматическими клетками.
В настоящее время воспалительные заболевания органов малого таза относят к аутоиммунному процессу, который протекает как самоподдерживающаяся патологическая реакция.
Иммуногистохимическое исследование определяет характер иммунологических нарушений. Анализ выявляет пациенток с аутоиммунным воспалением и аутоиммунным ответом в эндометрии, что определяет тактику их ведения.
CD-138
Это маркёр плазматических клеток. Его определение показано при неполной морфологической картине хронического эндометрита.
Диагностическое выскабливание слизистой оболочки матки рекомендовано проводить в среднюю и позднюю фазу пролиферации — на 7–10-й день менструального цикла.
Материалом для исследования являются парафиновый блок и предметные стёкла. В случае если материалом является образец ткани в растворе формалина, дополнительно должна быть выполнена услуга изготовления стёкол.
При проведении гистологического исследования в сторонней лаборатории необходимо предоставить протокол гистологического исследования.
Интерпретация результатов
Ответ выдаётся в виде описания микропрепарата, применяемых красителей и заключения. Заключение может интерпретировать только врач, направивший на проведение исследования.
Иммуногистохимическая диагностика рецепторного статуса эндометрия (стадия секреции, расширенное) (PR, ER, CD56, CD138, LIF)
Описание
Иммуногистохимическая диагностика рецепторного статуса эндометрия (стадия секреции, расширенное (PR, ER, CD-56, CD-138, LIF)) — исследование биоптата ткани, меченого антителами, под микроскопом. Анализ выполняется для определения рецепторного статуса эндометрия.
ИГХ-исследования проводят после выполнения гистологического исследования.
Иммуногистохимическое исследование
Вид морфологического исследования тканей, полученных в ходе биопсии, и меченых специфическими антителами. В основе метода лежит принцип взаимодействия «антиген-антитело». Ткань, в которой происходит патологический процесс, экспрессирует антигены. При нанесении на образец ткани антител, образуется комплекс антиген-антитело. Благодаря меткам, он становится доступным для визуализации. Врач-патоморфолог изучает количество клеток, окрашенных маркёром. Он определяет в исследуемой ткани локализацию клеток, гормонов и их рецепторов, ферментов, иммуноглобулинов, компонентов клеток и отдельных генов.
Хронический эндометрит
Хронический эндометрит — это клинико-морфологический синдром, при котором возникают функциональные и структурные изменения слизистой полости матки вследствие повреждения клеток эндометрия инфекционным агентом. Хронический эндометрит может протекать без отсутствия клинических признаков. Он часто является причиной нарушения репродуктивной функции, вплоть до бесплодия.
По этиологическому фактору хронический эндометрит бывает специфическим (с выявлением инфекции) или неспецифическим (полимикробной ассоциации).
«Золотой стандарт» в диагностике хронического эндометрита это гистологическое исследование.
Диагноз выставляется врачом-патоморфологом на основании изучения биоптатов эндометрия. Морфологически заболевание проявляется инфильтрацией стромы эндометрия плазматическими клетками.
В настоящее время воспалительные заболевания органов малого таза относят к аутоиммунному процессу, который протекает как самоподдерживающаяся патологическая реакция.
Иммуногистохимическое исследование определяет характер иммунологических нарушений. Анализ выявляет пациенток с аутоиммунным воспалением и аутоиммунным ответом в эндометрии, что определяет тактику их ведения.
Рецепторы к эстрогену (ER) и прогестерону (PR)
Эстроген и прогестерон — основные женские половые гормоны. Они вырабатываются яичниками и являются основными регуляторами деятельности репродуктивной системы женщины.
Рецепторы присутствуют в различных тканях, в том числе в молочных железах и матке.
Рецепторы к эстрогену (ER) и прогестерону (PR) являются веществами белковой природы, которые локализованы на поверхности опухолевой клетки. Под влиянием женских половых гормонов, рецепторы формируют комплекс, который стимулирует появление новых опухолевых клеток. Разрушение этого механизма лежит в основе гормонотерапии.
Иммуногистохимическое определение ER и PR способно повести дифференциальную диагностику характера опухоли, выявить чувствительность опухоли к гормонам. Анализ позволяет скорректировать и уточнить лечение, а также оценить эффективность.
Опухоли с высоким содержанием рецепторов к эстрогенам и прогестерону являются высокодифференцированными. Они обладают низкой пролиферативной активностью и характеризуются не агрессивным течением. Опухоли с такими показателями хорошо отвечают на гормональную терапию и имеют хороший прогноз. Эффективность гормональной терапии составляет около 50% при опухолях, экспрессирующих рецепторы к эстрогенам, и 75% при опухолях, экспрессирующих рецепторы к обоим гормонам.
Если опухолевые клетки имеют низкое число рецепторов к эстрогенам, гормональная терапия обычно неэффективна. Исключение составляют случаи, когда опухолевые клетки экспрессируют рецепторы только к прогестерону. При таком варианте гормональная терапия эффективна у 10% таких больных.
CD-56
CD-56 — прототипный маркёр ЕК-клеток. Помимо ЕК-клеток присутствует на эмбриональных, мышечных, нервных, эпителиальных клетках, некоторых активированных Т-клетках. CD-56 позитивны такие гематологические опухоли, как ЕК-клеточная или Т-клеточная лимфома, анапластическая крупноклеточная лимфома, плазмоклеточная миелома (плазмоклеточная лейкемия CD-56 негативна). Это молекулы адгезии клеточной поверхности, которые облегчают гемофильную адгезию и участвуют в контактном ингибировании роста, ЕК-клеточной цитотоксичности, развитии нервных клеток.
CD-138
Это маркёр плазматических клеток. Его определение показано при неполной морфологической картине хронического эндометрита.
LIF
LIF — лейкемия-ингибирующий фактор — продуцируется различными типами клеток, в том числе Т-клетками, клетками миеломоноцитарной линии, фибробластами, клетками печени, сердца и меланомы. LIF в течение длительного времени поддерживает эмбриональные стволовые клетки в недифференцированном состоянии, подавляя спонтанную дифференцировку. Кроме того, LIF обладает свойствами стимулировать синтез белков острой фазы в гепатоцитах, стимулировать дифференцировку холинергических нервов и подавлять адипогенез ингибируя липопретеинлипазу в адипоцитах. В эндометрии здоровых женщин экспрессия LIF резко возрастает в середине секреторной фазы, совпадая с предполагаемым окном имплантации.
Эндометрий бесплодных женщин и женщин с необъяснимым рецидивирующим выкидышем синтезирует значительно меньше LIF и его рецепторов (LIFR и gp130) в период рецептивности по сравнению со здоровыми женщинами. Обнаружена связь мутаций гена LIF и наличия антифосфолипидных антител у бесплодных женщин: у 100% женщин с мутациями гена LIF детектировались антифосфолипидные антитела, тогда как у бесплодных женщин, без этого вида мутаций, частота выявления антифосфолипидных антител составила 30% (p = 0,0035). LIF-R необходим для нормального развития мотонейронов в головном и спинном мозге. При нарушениях гена LIF-R, в эксперименте отмечают дефекты развития плаценты, скелета, нервной системы у эмбрионов, приводящие к перинатальной смерти. Возможные области использования этого маркёра — в изучении таких видов патологии, как онкологические, аутоиммунные и воспалительные заболевания в качестве диагностического инструмента, а также для мониторинга и терапевтического вмешательства.
Диагностическое выскабливание слизистой оболочки матки рекомендовано проводить в среднюю и позднюю фазу пролиферации — на 7–10-й день менструального цикла.
Интерпретация результатов
Единицы измерения: проценты (%).
Интерпретация: описательный ответ с указанием процента клеток, в которых определяется ЭР и ПР, CD56, LIF. Даётся подсчет пиноподий.
Референсные значения: диапазон значений индивидуален, зависит от фазы менструального цикла, анамнеза, проведённого лечения и клинического диагноза.
Форма выдачи результата
Проводится морфологическая оценка состояния эндометрия или морфологическая оценка опухоли молочной железы согласно классификации ВОЗ (2012).
Проводится подсчёт количества окрашенных ядер клеток желёз эндометрия, учитывается процентное соотношение окрашенных/неокрашенных ядер клеток на 100 учтённых клеток в 10 репрезентативных полях зрения при 40-кратном увеличении.
Расширенное комплексное иммуногистохимическое исследование эндометрия (CD138, CD20, CD16, CD56, ER, PR) в Москве
Срок исполнения:
Подготовка к исследованию
Описание
Биологический материал для данного исследования целесообразно получать посредством пайпель-биопсии эндометрия или соскоба из полости матки. После взятия биоптата его помещают в ёмкость с фиксирующим раствором на 24-48 часов. По окончании фиксации биоптат декальцинируют, обезвоживают и пропитывают парафином – получаются готовые парафиновые блоки. Для гистологического исследования из парафинового блока с помощью специального микроножа нарезают тончайшие срезы, которые затем прикрепляют к предметным стеклам и красят рутинными красителями. Затем для проведения иммуногистохимического исследования срезы окрашивают растворами антител, меченных флюоресцирующими метками, специфичными к одному из исследуемых маркеров. Если в клетках эндометрия присутствует искомый рецептор, антитела связываются с ним и при просмотре стекла под специальным микроскопом можно увидеть флюоресценцию, что будет свидетельствовать о положительном результате теста. Количество применяемых растворов с антителами соответствует количеству маркеров, которые исследуются в образце. Степень флюоресценции и процент клеток, в которых она есть, лежит в основе интерпретации результатов иммуногистохимического анализа.
CD-56 — прототипный маркёр ЕК-клеток. Помимо ЕК-клеток присутствует на эмбриональных, мышечных, нервных, эпителиальных клетках, некоторых активированных Т-клетках. CD-56 позитивны такие гематологические опухоли, как ЕК-клеточная или Т-клеточная лимфома, анапластическая крупноклеточная лимфома, плазмоклеточная миелома (плазмоклеточная лейкемия CD-56 негативна). Это молекулы адгезии клеточной поверхности, которые облегчают гемофильную адгезию и участвуют в контактном ингибировании роста, ЕК-клеточной цитотоксичности, развитии нервных клеток.
Противопоказания к проведению данного исследования:
— Инфекционные и воспалительные болезни органов мочеполовой системы в стадии обострения;
— Беременность.
